褪黑素抑制酒精性脂肪肝的大鼠實驗研究.pdf

1、研究背景：酒精性脂肪肝是由酒精攝入過多引起的疾病，是酒精性肝病的一種表現(xiàn)，進一步發(fā)展可導致肝纖維化、肝硬化等嚴重肝臟疾病。較多研究認為酒精性脂肪肝發(fā)生與氧化應(yīng)激有密切關(guān)系，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)可能成為酒精性肝病的治療靶點。在酒精性肝病的發(fā)生過程中，多種炎癥因子及有毒物激活核轉(zhuǎn)錄因子-kappaB(unclear transcription factor-κB，NF-κB)和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TN

2、F-α），調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄，促進多種炎癥因子生成，參與疾病過程。褪黑素是一種自由基清除劑，具有強大的抗氧化作用，根據(jù)相關(guān)文獻及我們的前期研究認為褪黑素在酒精性肝病的發(fā)病過程中，可能對肝臟存在保護作用。因此，本實驗在建立酒精性脂肪肝動物模型的基礎(chǔ)上，進一步探討酒精性脂肪肝的發(fā)病與NF-κB、氧化應(yīng)激相關(guān)的機制以及褪黑素對酒精性脂肪肝的保護作用。
　　目的：探討褪黑素對酒精性脂肪肝的保護作用，并對其發(fā)揮作用的可能機制進行探索。

3、　　方法：52只大鼠隨機分成5組：正常組（10只）、模型組(12只)、褪黑素低中高劑量組各（10只），用酒精灌胃的方法，持續(xù)8周建立酒精性脂肪肝模型。褪黑素組大鼠在酒精灌胃后腹腔注射褪黑素。8周實驗結(jié)束后，HE染色觀察大鼠肝臟病理改變，免疫組化法檢測肝組織中NF-κB、TNF-α和白介素-10（interleukin-10，IL-10）的表達。全自動生化分析儀檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine transarninase,ALT）、谷草

4、轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、膽紅素（total bilirubin,TBIL）水平。生化法檢測肝勻漿丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase,GPx）活性。提取大鼠肝臟細胞核蛋白，用以ELISA為基礎(chǔ)的方法檢測NF-κB p65的DNA結(jié)合活性。

5、r>　　結(jié)果：與正常組比較，模型組肝細胞可見明顯脂肪變性，肝細胞腫脹，炎性細胞浸潤明顯（P＜0.01），而褪黑素各組肝組織病理變化程度均較模型組減輕（P＜0.01）。與模型組相比，褪黑素低中高劑量組大鼠血清中ALT、AST活性和TBIL水平顯著降低（P＜0.05），肝勻漿MDA含量顯著降低（P＜0.01），SOD、GPx活性明顯升高（P＜0.01）。并且褪黑素能降低大鼠肝組織中NF-κB，TNF-α和IL-10的表達（P＜0.01）。在