TGF-β1和α-SMA在慢性根尖周疾病中表達(dá)的研究.pdf

1、背景及目的:
　　根尖周疾病是由根管內(nèi)感染經(jīng)根尖孔引起的根尖周組織的免疫病理性反應(yīng)。細(xì)菌感染是導(dǎo)致根尖周疾病的主要病因。機(jī)體對(duì)來(lái)自根管感染的防御機(jī)制包括細(xì)胞因子導(dǎo)致的免疫炎癥反應(yīng),在根尖周疾病中起著促炎作用,并導(dǎo)致根尖周的骨吸收;另一方面,細(xì)胞因子還參與根尖周疾病的組織修復(fù)。根尖周疾病的發(fā)病及修復(fù)機(jī)制復(fù)雜,其精確的機(jī)制至今尚未闡明,探討根尖周疾病的發(fā)病機(jī)制、免疫致病及防御機(jī)制具有重要的理論意義。
　　轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(tr

2、ansforming growth factor-β1,TGF-β1)是因組織損傷、細(xì)菌及其產(chǎn)物使炎癥細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子,具有促炎作用,可引發(fā)骨吸收因子的產(chǎn)生。研究顯示,在多種纖維性疾病和瘢痕愈合中TGF-β1能促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞的分化,是組織修復(fù)的關(guān)鍵因子,可加速損傷的早期愈合和組織重建。
　　α-平滑肌激動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)是肌成纖維細(xì)胞的主要標(biāo)志物。組織損傷后,成纖維細(xì)胞在TGF-β

3、的作用下表達(dá)α-SMA,造成細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)過(guò)度合成和堆積,導(dǎo)致各種器官和組織的纖維性病變。目前,對(duì)于α-SMA在根尖周疾病中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　本課題我們通過(guò)觀察不同類(lèi)型的慢性根尖周疾病組織中TGF-β1和α-SMA的表達(dá)和分布情況,探討TGF-β1和α-SMA在根尖周疾病中的致病作用。研究結(jié)果對(duì)于揭示TGF-β1和α-SMA在根尖周疾病發(fā)病機(jī)制中的作用具有理論意義。
　　

4、方法:
　　本實(shí)驗(yàn)選擇2012年7月~2013年6月期間在暨南大學(xué)荔灣口腔教學(xué)醫(yī)院臨床診斷為根尖囊腫和根尖肉芽腫并接受根尖刮治手術(shù)的病例40例,其中根尖肉芽腫20例;根尖囊腫20例;正常對(duì)照組20例,來(lái)自因正畸需要拔除的牙周健康的前磨牙牙周膜,所有這些前磨牙牙根發(fā)育完全并沒(méi)有根尖周疾病。標(biāo)本經(jīng)10％中性福爾馬林緩沖液固定48 h以上。標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋、組織連續(xù)切片,HE染色,光學(xué)顯微鏡下觀察其組織學(xué)改變;采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)根尖周

5、組織中TGF-β1和α-SMA的表達(dá)和分布。應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用Nemenyi檢驗(yàn)進(jìn)行三個(gè)獨(dú)立樣本兩兩比較。以P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、組織學(xué)觀察
　　正常對(duì)照組牙周膜組織結(jié)構(gòu)正常,未見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。根尖周肉芽組:可見(jiàn)明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。根尖囊腫組:上皮層表現(xiàn)為細(xì)胞間水腫、以及上皮層下方明顯的慢性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);囊壁的纖維組織層見(jiàn)密集的膠原纖維組織。
　　2、

6、TGF-β1免疫組織化學(xué)法結(jié)果
　　正常對(duì)照組未見(jiàn) TGF-β1的表達(dá)。根尖肉芽腫組:TGF-β1在毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和少量的炎癥細(xì)胞上表達(dá)。根尖囊腫組:TGF-β1在囊腫壁的上皮層細(xì)胞、上皮層下方的炎癥細(xì)胞和毛細(xì)血管中大量表達(dá);在囊腫的纖維組織層,TGF-β1在成纖維細(xì)胞、纖維組織、血管和血管周?chē)?rùn)的炎癥細(xì)胞上均有大量的表達(dá)。結(jié)果顯示,TGF-β1在根尖囊腫表達(dá)明顯高于根尖肉芽腫(P<0.05)。
　　3、α-SMA免疫組

7、織化學(xué)法結(jié)果
　　正常對(duì)照組α-SMA表達(dá)陰性。根尖肉芽腫組:α-SMA主要表達(dá)于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及毛細(xì)血管壁。根尖囊腫組:在根尖囊腫的上皮層細(xì)胞輕度表達(dá)α-SMA,毛細(xì)血管壁和毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞均表達(dá)α-SMA;在根尖囊腫的纖維組織層見(jiàn)α-SMA大量表達(dá)。結(jié)果顯示,根尖囊腫組α-SMA的表達(dá)明顯高于根尖肉芽腫組(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.與正常組相比較,各組慢性根尖周疾病組織中TGF-β1和α-SMA的表