病理性瘢痕中神經生長因子分布及特點的初步研究.pdf

1、目的:神經生長因子(nervegrowthfactor,NGF)作為最早被發(fā)現的神經肽之一,除了在神經系統(tǒng)疾病和修復再生中的重要作用外,NGF在病理性瘢痕中的作用正引起人們的關注。有研究發(fā)現NGF在增生性瘢痕中有較強表達,但在瘢痕疙瘩和萎縮性瘢痕中NGF密度以及NGF在病理性瘢痕中如何分布的未見報道。本實驗擬通過對病理性瘢痕中NGF的免疫組化測定,探討NGF在病理性瘢痕中的分布特點及可能的作用機制。
　　 方法:收集臨床病理性瘢

2、痕切除手術后標本36例,分為A.B.C三組:A瘢痕疙瘩,B增生性瘢痕,C萎縮性瘢痕。另取正常皮膚標本12例作為對照。將所取標本于10％的中性福爾馬林中固定12h后,常規(guī)梯度酒精脫水,浸蠟包埋切片,分別做蘇木精.伊紅(HE)染色和免疫組織化學染色。NGF免疫組化染色陽性信號為棕黃色顆粒。NGF圖像分析方法:①在400倍顯微鏡下分別觀察各組表皮和真皮層中呈棕黃色的NGF陽性顆粒個數,并進行計數。每張切片觀察5個視野取其均數進行比較。②利用I

3、mage-ProPlus6.0圖像分析系統(tǒng),將NGF的表達強度用IOD值表示,每張切片表皮和真皮各取五個視野,分別測定每個視野的IOD值,取其平均值作為該標本表皮和真皮的IOD值,分別進行比較。
　　 結果:一HE染色光鏡下組織形態(tài):①正常皮膚組表皮透明層與角質層相對較厚；真皮乳頭突出明顯,乳突數目較多；網織層見成纖維細胞附著,核小,著色深,細胞質少,數目較少。②瘢痕疙瘩組表皮萎縮,基底層、棘層細胞胞體大,層數增加,相對層數較多

4、；顆粒層、透明層與角質層僅見較薄的嗜酸性染色層,無法區(qū)分；真皮乳頭可見,乳突數目少,低平；網織層厚,致密,見粗大的膠原,染色深,排列紊亂,有玻璃樣變性,并可見血管、淋巴管,毛細血管閉鎖；成纖維細胞兩層均見,數目多。③增生性瘢痕組表皮基底層和棘層細胞相對層數較多,其細胞間連接較正常皮膚顯得松散；透明層與角質層變薄明顯；真皮乳頭突出度較正常皮膚低矮,較平,數目較正常皮膚減少；網織層較厚,較致密,并可見血管、淋巴管,毛細血管擴張；成纖維細胞兩

5、層均見,數目多。④萎縮性瘢痕表皮矮柱狀的基底層細胞和真皮相連接,附著于基底膜,其相對層數相對增生性瘢痕較少；其細胞間連接較正常皮膚顯得松散。顆粒層細胞呈較扁的梭形,較正常皮膚明顯變??；透明層與角質層變薄明顯。真皮乳頭層較疏松,染色較淡,其下為網織層,較增生性瘢痕和瘢痕疙瘩薄,較致密,見粗大的膠原,染色深,較不規(guī)則,并可見毛細血管閉鎖。二NGF免疫組畫染色圖像分析:1各病理性瘢痕組表皮NGF陽性顆粒數、NGF平均光密度和積分光密度明顯高于

6、正常皮膚組,相比較有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。萎縮性瘢痕組表皮NGF陽性顆粒數、NGF平均光密度和積分光密度明顯少于瘢痕疙瘩組和增生性瘢痕組,相比較有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。瘢痕疙瘩組表皮NGF平均光密度和NGF積分光密度與增生性瘢痕組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2各病理性瘢痕組真皮NGF陽性顆粒數、NGF平均光密度和積分光密度明顯高于正常皮膚組,相比較有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。萎縮性瘢痕組真皮NGF陽性顆粒數、NGF平

7、均光密度和積分光密度明顯低于瘢痕疙瘩組和增生性瘢痕組,兩者比較有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。瘢痕疙瘩組真皮NGF平均光密度和NGF積分光密度與增生性瘢痕組比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 結論:1.被染成棕色的NGF陽性顆粒物質存在于正常皮膚及病理性瘢痕的表皮和真皮層,各組表皮NGF陽性顆粒數較真皮層多。2.病理性瘢痕中NGF陽性顆粒分布廣、密度高、著色濃,以表皮NGF陽性細顆粒分布最多,真皮成纖維細胞密集處NGF陽性細