PISD在結直腸腫瘤中的表達及臨床意義.pdf

1、背景：腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與一系列的基因改變有關，其中與結直腸癌有關的有APC-Wnt信號通路的異常，錯配修復（MMR）缺陷，RAF瀑布鏈，抑癌基因p53的改變和染色體的互換。PISD、NIBP、BAI2、STOML1、MRPL21、MRPL16、MKKS這7個新基因在結直腸腫瘤中已被發(fā)現(xiàn)高表達，但其在蛋白水平及組織中的表達情況目前仍不得而知。本實驗通過熒光定量PCR、免疫組化、蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）進一步探討這7個新發(fā)現(xiàn)

2、的基因在大腸癌細胞株及組織內(nèi)表達情況以及其與臨床病理的關系。
　　 方法：應用熒光定量PCR法檢測HT-29、Colo205、SW480、CoCa2、HCT116、SW1116、SW620大腸癌細胞株，對7種基因表達情況進行初篩。對于高表達的基因應用蛋白質(zhì)印跡法(WB)測定其蛋白表達水平。對于在基因及蛋白水平均高表達的基因，用免疫組化法檢測腫瘤組織和癌旁正常組織表達情況，探究其與結直腸腫瘤的臨床病理關系。
　　 結果：對

3、大腸癌細胞株進行初步的熒光定量PCR篩查，測定其細胞拷貝數(shù)，MRPL21、MRPL16、MKKS、PISD這四個基因具有較高的表達量，且在不同的細胞株內(nèi)表達差異較小。進一步選擇PISD與MRPL21這兩個基因進行了Western blot檢測，PISD蛋白在7種細胞株中均檢測到一條特異性條帶，大小約為55Kda，而MRPL21則未能檢測出特異性條帶。選擇OD-CT-DgLim01-001大腸癌組織芯片，進行免疫組織化學實驗。PISD在正

4、常癌旁組織均為陰性表達。在93例（186點位）結腸直腸腫瘤組織中，總陽性表達率為62.9％(117/186點位)。結直腸癌組織和正常結直腸組織中，PISD的表達與年齡、性別、腫瘤部位大小、淋巴結轉移情況無關。但與腫瘤分化程度、腫瘤的浸潤深度存在明顯相關性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。
　　 結論: PISD在大腸癌組織中中表達顯著上調(diào)，提示PISD在結直腸癌發(fā)生和發(fā)展過程中可能起著重要的作用并可能成為診斷乃至基因治療的靶點