豬生長激素抗獨(dú)特型抗體的制備及其生物特性的研究.pdf

1、豬生長激素(porcine growth hormone，pGH)是豬垂體前葉分泌的長為191個(gè)氨基酸的單鏈多肽類激素。生長激素是調(diào)節(jié)機(jī)體正常生長和發(fā)育的主要激素之一，它促進(jìn)氨基酸進(jìn)入細(xì)胞以及RNA的生物合成，從而加速蛋白質(zhì)的合成，不僅促進(jìn)骨的生長，且影響許多組織的生長；GH促進(jìn)脂肪的分解以及脂肪酸氧化供能，加速脂類的代謝，顯著提高豬的生長速度、飼料報(bào)酬和瘦肉率。研制開發(fā)豬生長激素類飼料添加劑具有較高的商業(yè)價(jià)值和科研價(jià)值。 豬生

2、長激素最早從豬的垂體組織中提取，不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)工，而且產(chǎn)量有限，無法在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。隨著科技發(fā)展，國外最早于1983年用大腸桿菌生產(chǎn)出pGH后，人們開始通過生物工程方法制備豬生長激素。用生物工程方法制備豬生長激素，涉及基因調(diào)控、表達(dá)及蛋白質(zhì)分離純化等多項(xiàng)技術(shù)。目前生物工程生產(chǎn)的豬生長激素由于蛋白質(zhì)生物活性低、產(chǎn)量低、成本高、并且需連續(xù)、大劑量多次肌肉注射或皮下包埋等不足之處，限制了其應(yīng)用。激素免疫學(xué)的興起，使有目的的改變內(nèi)分泌平衡并產(chǎn)生有

3、意義的生理學(xué)效應(yīng)成為可能，許多學(xué)者對此已進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)研究，已經(jīng)取得很大成功。 本實(shí)驗(yàn)采用純化的豬生長激素單克隆抗體作為抗原，免疫山羊，獲得羊抗豬生長激素抗獨(dú)特型抗體，并對其免疫特性進(jìn)行鑒定。還以異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記所獲得豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為探針，使之與豬肝細(xì)胞上生長激素受體結(jié)合，應(yīng)用共聚焦激光掃描顯微鏡，觀察免疫熒光標(biāo)記的豬生長激素抗獨(dú)特型抗體在豬肝細(xì)胞的結(jié)合情況，對生長激素抗獨(dú)特型抗體在結(jié)構(gòu)上模擬生長激素的

4、結(jié)合特性進(jìn)行定位研究，第三，在小白鼠上驗(yàn)證其的促生長活性。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所獲得豬生長激素抗獨(dú)特型抗體具有與生長激素相似的免疫學(xué)特性。標(biāo)記的生長激素抗獨(dú)特型抗體能夠與豬肝細(xì)胞膜生長激素受體特異性的結(jié)合。試驗(yàn)證明所獲得的豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為豬生長激素的模擬物在結(jié)構(gòu)上存在著與豬生長激素相似性。且在小白鼠的促生長活性試驗(yàn)中證明豬生長激素抗獨(dú)特型抗體作為豬生長激素的模擬物對小白鼠具有促生長活性。 本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果為應(yīng)用抗獨(dú)特型抗體促