超速凍存小鼠卵巢組織的可行性研究.pdf

1、目的:探討超速冷凍和慢速冷凍技術(shù)對(duì)小鼠卵巢組織冷凍損傷程度的影響.方法:使用HE染色和TUNEL技術(shù)分別定量評(píng)估凍存后的始基卵泡及初級(jí)卵泡的形態(tài)學(xué)及DNA片斷的變化.用免疫組化方法檢測凍存復(fù)蘇后的小鼠卵巢組織中竇前卵泡中Cx43及Cx37的表達(dá).結(jié)果:超速冷凍組(A組)中始基卵泡及初級(jí)卵泡數(shù)為61.25±12.88,慢速冷凍組(B組)為56.90±11.12,新鮮對(duì)照組(C組)為83.55±12.33.與新鮮對(duì)照組比較,凍存組中卵泡數(shù)顯

2、著下降(P<0.001),兩凍存組之間無顯著差異(P>0.05).A、B和C三組中,正常形態(tài)的始基卵泡及初級(jí)卵泡數(shù)與計(jì)數(shù)卵泡數(shù)的比值分別為0.689±0.050、0.723±0.075和0.897±0.184.與新鮮對(duì)照組比較,凍存組中正常形態(tài)的卵泡數(shù)顯著下降(P<0.001),兩凍存組之間無顯著差異(P>0.05).始基卵泡及初級(jí)卵泡中的卵母細(xì)胞標(biāo)記陽性的比率:新鮮對(duì)照組中為23.53﹪(47/231),超速冷凍組為12.50﹪(28

3、/171),慢速冷凍組為9.88﹪(19/143).在二凍存組之間始基卵泡和初級(jí)卵泡的凋亡比率無顯著差異(P>0.05),但與對(duì)照組相比存在明顯差異(P<0.05).Cx43表達(dá)陽性率分別為47.10﹪(73/155)、54.60﹪(101/185)、98.73﹪(234/237).Cx37表達(dá)陽性率分別為42.86﹪(48/112)、52.04﹪(51/98)、80.10﹪(153/191).在二凍存組之間竇前卵泡中Cx43及Cx37