甜瓜抗蔓枯病基因聚合的研究.pdf

1、蔓枯病是由亞隔孢殼屬的Didymella.bryoniae(Auersw.)(=Mycosphaerellacitrullina(C.O.Sm.) Gross)引起的一種真菌性土傳病害，可危害甜瓜、黃瓜、哈密瓜、西瓜、西葫蘆等至少12個屬，23種葫蘆科作物。蔓枯病對我國乃至世界甜瓜生產(chǎn)的危害日益嚴(yán)重，尤其在設(shè)施栽培中。由于化學(xué)防治的局限性日益突出，選育抗病的栽培品種已成為最經(jīng)濟(jì)有效防治蔓枯病的措施。目前的抗蔓枯病的甜瓜品種僅攜帶單個抗病

2、基因，隨著蔓枯病菌生理小種的變異，導(dǎo)致這些抗性品種的抗性不足，甚至失去抗性，因此培育聚合多個抗蔓枯病基因的甜瓜品種成為了甜瓜育種者的選擇。本文首次利用多個甜瓜蔓枯病抗源雜交獲得了聚合抗源，對其抗性鑒定表明聚合抗源抗性得到了顯著提高。并利用145-471F1連續(xù)自交獲得了聚合基因穩(wěn)定的一份聚合抗源。同時(shí)，我們利用聚合抗源145-398與哈密瓜商品種“白皮脆”雜交、回交，利用分子標(biāo)記輔助選擇，獲得了抗蔓枯病且商品性良好的哈密瓜株系。具體研究

3、如下:
　　1.甜瓜蔓枯病抗性基因聚合及其防衛(wèi)基因的表達(dá)分析
　　利用甜瓜蔓枯病抗源PI140471、PI157082、PI511890、PI482398、PI482399和PI420145相互雜交，獲得了8份抗蔓枯病聚合抗源。利用表型鑒定，在采用梯度濃度孢子液接種鑒定的基礎(chǔ)上，利用RT-PCR技術(shù)研究了接種后苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因、抗壞血酸氧化酶(APX)基因、幾丁質(zhì)酶（CHT）基因等防衛(wèi)基因在聚合基因材料中的表達(dá)情

4、況。結(jié)果顯示，890-398(PI511890×PI482398)、145-471(PI420145×PI140471)抗性最高。防衛(wèi)基因在聚合基因材料中高表達(dá)或早表達(dá)，為其提供了較高的抗性。本文創(chuàng)制的聚合基因材料可用于甜瓜的抗蔓枯病聚合育種，對甜瓜抗病育種具有重要意義。
　　2.甜瓜蔓枯病聚合抗源的選育及相關(guān)SCAR標(biāo)記的轉(zhuǎn)化
　　以合有單個抗蔓枯病基因的抗源PI420145（Gsb-6、PI140471（Gsb-1）為材

5、料雜交，所得F1連續(xù)自交多代，利用分子標(biāo)記輔助選擇的方法篩選聚合抗性基因Gsb-1和Gsb-6的目的單株。其中將與Gsb-6連鎖的AFLP標(biāo)記E-TG/M-CTC200轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記SGSB1800，能夠迅速、簡便的用于分子標(biāo)記輔助選擇，大大提高了甜瓜抗蔓枯病新品種的選擇效率。
　　3.分子標(biāo)記輔助甜瓜抗蔓枯病育種材料的選擇
　　以高感蔓枯病的哈密瓜自交系“白皮脆”為母本，聚合抗源145-398為父本，雜交獲得F1，再以