甘藍(lán)型油菜PEPC基因保守序列的克隆和種子特異性ihpRNA表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文甘藍(lán)型油菜PEPC基因保守序列的克隆和種子特異性ihpRNA表達(dá)載體的構(gòu)建姓名：張勇申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：牛應(yīng)澤20080501利用質(zhì)粒載體pBSNEI(此載體有兩個(gè)特點(diǎn)：1、內(nèi)含子片段NEI(130bp)來自甘藍(lán)型油菜PEPC基因，由上海鼎安科技有限公司人工合成，2、內(nèi)含子5’端反向插入載體pBS—NEI中)，在內(nèi)含子片段NEI兩端選擇合適的酶位點(diǎn)，把PEPC基因片段一個(gè)正向插入

2、，一個(gè)反向插入，建成具有反向重復(fù)框的載體pBS—B2一NEI—B1。4種子特異表達(dá)載體pCAMNapin的構(gòu)建從pMDNapin載體上，經(jīng)BamHI和HindlII雙酶切切下來的Napin基因片段與經(jīng)同樣雙酶切的植物表達(dá)載體pCAMBIAl391連接，得到載體pCAMNapin5PEPC基因ihpRNA植物表達(dá)載體的構(gòu)建把從pBSB2NEI—B1載體上，用酶切下的反向重復(fù)框連接到經(jīng)同種酶切且去磷酸化的表達(dá)載體pCAMNapin上，再克隆

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