棉鈴蟲細胞HzAm1的低血清培養(yǎng)優(yōu)化研究.pdf

1、昆蟲細胞一桿狀病毒表達體系給真核生物重組醫(yī)用蛋白和生物殺蟲劑的工業(yè)化生產帶來了希望。為了提高桿狀病毒在昆蟲細胞中的復制量或重組蛋白在昆蟲細胞中的表達量，傳統(tǒng)的方法是在昆蟲細胞培養(yǎng)基中添加10％左右的胎牛血清。由于血清成本高、來源少，而且血清成份復雜，還是支原體和其它異源病毒污染的重要來源，給基因工程表達的重組蛋白的下游分離處理發(fā)展帶來了困難，因此，用這一體系進行大規(guī)模的商業(yè)化生產還存在著一定的挑戰(zhàn)。
　　 本課題從三種商業(yè)化的培

2、養(yǎng)基TC-100、IPL-41以及Grace's中篩選出最適合棉鈴蟲細胞HzAml生長的基礎培養(yǎng)基TC-100，然后以該培養(yǎng)基為基礎，補加一定量的水解乳蛋白以及酵母提取物等，可以將血清用量從常用的10％降至1％，進行棉鈴蟲細胞HzAml低血清培養(yǎng)的研究。在此基礎上，通過將較為廉價的Grace's培養(yǎng)基中加入一些如酵母提取物、水解乳蛋白、脂類復合物、氫化可的松、氨基酸以及鋅、鉬、錳微量元素，對Grace's培養(yǎng)基進行改善，在血清為5％的條