奶牛飼料添加劑柑橘黃酮的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究.pdf

1、隨著畜牧業(yè)和飼料工業(yè)的蓬勃發(fā)展，飼料添加劑的使用日趨廣泛。抗生素、激素、促生長(zhǎng)劑等人工合成飼料添加劑在畜牧業(yè)的長(zhǎng)期大量應(yīng)用，動(dòng)物性食品的安全問(wèn)題已引起人們的關(guān)注。解決這一問(wèn)題的關(guān)鍵就是要嚴(yán)格控制奶牛飼料的安全，用綠色飼料添加劑替代普通飼料添加劑。 本研究通過(guò)藥理學(xué)試驗(yàn)方法探討柑橘黃酮對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫機(jī)能、抗氧化、抗菌抗炎、生長(zhǎng)性能等的影響，為柑橘黃酮作為奶牛飼料添加劑的開(kāi)發(fā)利用提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 1.采用分光光度法測(cè)定柑

2、橘黃酮中總黃酮的含量，采用高效液相色譜法測(cè)定橙皮苷的含量。結(jié)果柑橘黃酮中總黃酮的含量為12.30％；橙皮苷的含量為5.72％。 2.小鼠灌胃最大受試藥物量測(cè)定結(jié)果顯示，柑橘黃酮小鼠灌胃給藥的最大量為17.86g·kg<'-1>·d<'-1>，提示柑橘黃酮毒性小，安全性好。 3.小鼠腹腔注射不同劑量(200、600 kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥9天，測(cè)定小鼠日增重、日采食量。結(jié)果表明，低劑量(200k

3、g<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮可使雌鼠的日增重增加9.35％，日采食量增加6.59％，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示柑橘黃酮(200kg<'-1>·d<'-1>)對(duì)雌性小鼠的生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。 4.小鼠腹腔注射不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥9天，測(cè)定小鼠免疫器官的臟器指數(shù)。結(jié)果表明，柑橘黃酮不同劑量組(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的雌鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯高于對(duì)照組

4、(P<0.05)。提示柑橘黃酮對(duì)雌性幼年小鼠有免疫增強(qiáng)作用。 小鼠腹腔注射不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥20天，測(cè)定小鼠巨噬細(xì)胞吞噬血中剛果紅溶液的能力。結(jié)果顯示，柑橘黃酮各劑量組小鼠巨噬細(xì)胞對(duì)血中剛果紅的吞噬能力明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。提示柑橘黃酮能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能。 5.用D-半乳糖(D-galactose，1g·kg<'-1>·d<

5、'-1>)建立小鼠衰老模型，同時(shí)分別灌胃給予不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮。給藥42天后測(cè)定肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。結(jié)果表明，柑橘黃酮顯著升高D-半乳糖致衰老小鼠的肝臟SOD酶活性(P<0.05和P<0.01)，同時(shí)明顯降低肝臟MDA水平(P<0.05和P<0.0 1)。提示柑橘黃酮具有較強(qiáng)的抗氧化作用。 6.采用試管稀釋法測(cè)定柑橘黃酮的抑菌作用，對(duì)5種常見(jiàn)細(xì)菌以及2種真

6、菌的最低抑菌濃度(MIC)進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，柑橘黃酮對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌作用最強(qiáng)、對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌及乙型副傷寒沙門(mén)菌次之、對(duì)白色念珠菌和黑曲霉無(wú)抑菌作用。 7.SD雌性大鼠受孕第一天開(kāi)始，灌胃不同劑量的柑橘黃酮(200、600mg·kg<'-1>·d<'-1>)直至產(chǎn)下子鼠后處死。孕鼠于產(chǎn)后72h，經(jīng)乳頭管灌注大腸桿菌內(nèi)毒素，建立大鼠乳腺炎模型，灌注后24 h處死大鼠，取乳腺組織固定，進(jìn)行病理組織學(xué)觀察，

7、同時(shí)測(cè)定血清中堿性磷酸酶(AKP)的含量。結(jié)果表明，高劑量組(600mg·kg<'-1>·d<'-1>)柑橘黃酮能使內(nèi)毒素誘發(fā)的大鼠乳腺炎的炎癥反應(yīng)減輕，柑橘黃酮高劑量組AKP的含量明顯低于模型組(P<0.01)。提示柑橘黃酮具有一定的抗炎作用。 綜上所述，柑橘黃酮毒性小，安全性高，具有抗氧化、抗炎、抗菌作用，并具有一定的免疫增強(qiáng)作用以及一定的促生長(zhǎng)作用，本研究結(jié)果對(duì)該提取物作為奶牛飼料添加劑的開(kāi)發(fā)具有一定的指導(dǎo)作用。但其在奶牛