NF-κB及其調(diào)控的miRNA在宮頸癌移植瘤及癌旁組織中的活化和表達(dá).pdf

1、目的:
　　研究宮頸癌移植瘤小鼠的癌與癌旁組織中miR-15b，miR-16的表達(dá)狀況以及NF-κB信號(hào)通路在宮頸癌癌旁組織活化情況，為宮頸癌的早期診斷和治療提供新思路。
　　方法:
　　采用小鼠宮頸癌U14細(xì)胞懸液建立小鼠腹水瘤模型，傳3代后將腹水瘤細(xì)胞接種于30只昆明小鼠右側(cè)腋窩皮下建立皮下移植瘤模型。待瘤塊直徑大小為1.5cm×1.5cm時(shí)（約15日后），將其頸椎脫臼處死，取癌組織與距離癌組織2cm以上的癌旁組織

2、，以及正常的脂肪組織，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測各標(biāo)本中miR-15b，miR-16的表達(dá)狀況，利用免疫組化檢測NF-κB(p65)蛋白在各組織中細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的表達(dá)及定位情況。
　　結(jié)果:
　　1.U14細(xì)胞懸液接種于雌性昆明小鼠腹腔，2周后腹水瘤模型成功建立，取其腹水瘤細(xì)胞建立皮下移植瘤模型，2周后成瘤率100％，移植瘤切片行HE染色，可見宮頸癌細(xì)胞浸潤皮下脂肪生長，造模成功。
　　2.實(shí)時(shí)定量檢測miR-15

3、b和miR-16在宮頸癌組織及癌旁組織的表達(dá)情況，miR-15b在宮頸癌組織中表達(dá)為32.21±3.67，明顯高于癌旁組織的25.16±1.86和正常組織的1.00（P＜0.05），癌旁組織也顯著高于正常組織（P＜0.05）;miR-16在宮頸癌組織中表達(dá)為28.63±2.34，明顯高于癌旁組織的22.16±1.76和正常組織的1.00(P＜0.05)，癌旁組織也顯著高于正常組織（P＜0.05）。
　　3.免疫組織化學(xué)顯示在正常脂

4、肪組織中，NF-κB(p65)蛋白主要定位于胞漿，而在癌組織與癌旁組織中，NF-κB(p65)蛋白主要位于胞核。宮頸癌組織中NF-κB(p65)蛋白的表達(dá)顯著高于癌旁組織和正常組織(P＜0.05)，癌旁組織也顯著高于正常組織（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.NF-κB通路在宮頸癌組織和癌旁組織中均處于活化狀態(tài)。
　　2.該信號(hào)通路調(diào)控的miR-15b和miR-16在癌組織和癌旁組織中亦為高表達(dá)狀況。
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