抗腫瘤藥物對(duì)人胃癌細(xì)胞體外增殖及小鼠胚胎體外發(fā)育的影響.pdf

1、近年來(lái)的研究表明，許多人類難以治愈的疾病(如自身免疫性紅斑狼瘡)和腫瘤都與細(xì)胞基因組DNA甲基化異常有著密切的聯(lián)系。隨著DNA甲基化研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)，一些核苷類抗腫瘤藥物可以改變某些腫瘤細(xì)胞(如肝癌細(xì)胞、Hela細(xì)胞)基因組DNA的甲基化模式，使這些病變的腫瘤細(xì)胞得以逆轉(zhuǎn)。因此，這種策略已經(jīng)成為臨床治療腫瘤的一個(gè)新途徑。
　　本論文首先研究了5-氟尿嘧啶及5-氮雜胞苷兩種核苷類抗腫瘤藥物對(duì)人胃癌細(xì)胞體外增殖的影響，目的在于探究

2、這兩種藥物抑制胃癌細(xì)胞增殖的效果。隨后，以分子生物學(xué)技術(shù)為手段，研究了這兩種藥物對(duì)人胃癌細(xì)胞基因組DNA甲基化模式的影響，目的在于探究這兩種藥物的抑癌機(jī)理。最后，以小鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，研究了這兩種藥物對(duì)其早期胚胎體外發(fā)育的影響，以期為患胃癌的妊娠期婦女能否服用這兩種抗腫瘤藥物提供前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.采用含不同濃度上述兩種藥物的1640培養(yǎng)液，體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株(MGC-803)。首先采用MTT(3-(

3、4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-diphenytetrazoliumromide)法檢測(cè)了這兩種藥物對(duì)細(xì)胞體外增殖的影響。結(jié)果表明，隨著5-氟尿嘧啶濃度的升高，細(xì)胞的吸光度值(absorbance，A值)逐漸減小，各處理組與對(duì)照組之間的A值均差異顯著(P<0.05)；而5-氮雜胞苷處理后的細(xì)胞，其A值雖有降低的趨勢(shì)，但各處理組與對(duì)照組之間的A值均差異不顯著(P>0.05)。隨后，進(jìn)一步采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法驗(yàn)

4、證上述結(jié)果的正確性。結(jié)果表明，5-氟尿嘧啶處理后的細(xì)胞，在處理的第2天時(shí)就呈現(xiàn)一種凋亡的趨勢(shì)，各處理組與對(duì)照組之間均差異顯著(P<0.05)。此外，隨著5-氟尿嘧啶濃度的增大，細(xì)胞凋亡的趨勢(shì)雖有所增大，但各處理組之間均差異不顯著(P>0.05)。不同濃度5-氮雜胞苷處理后的細(xì)胞，其凋亡趨勢(shì)不明顯，甚至有繼續(xù)增殖的趨勢(shì)，但在處理的第3天時(shí)，其凋亡的趨勢(shì)與MTT法檢測(cè)的結(jié)果相一致。此外，隨著5-氮雜胞苷處理天數(shù)的增加，細(xì)胞凋亡的趨勢(shì)越趨明顯

5、，在處理的第8天時(shí)，各處理組與對(duì)照組之間及多個(gè)處理組之間均差異顯著。
　　2.采用甲基敏感擴(kuò)增多態(tài)性(methylation sensitive amplification polymorphism，MSAP)技術(shù)檢測(cè)了經(jīng)兩種藥物處理后的人胃癌細(xì)胞基因組DNA甲基化模式的改變。結(jié)果表明，隨著這兩種藥物濃度的增加，人胃癌細(xì)胞基因組DNA的全甲基化、半甲基化及總甲基化水平總體呈現(xiàn)增加、降低及增加的趨勢(shì)，各處理組與空白對(duì)照組之間及多個(gè)處