生防鏈霉菌M1-8菌株發(fā)酵條件優(yōu)化及特性研究.pdf

1、Streptomycetes M1菌株是遼寧省微生物科學(xué)研究院在農(nóng)抗產(chǎn)生菌的研究中，從土壤中分離篩選到的有益菌株。為使其發(fā)酵液抑菌活性提高，生產(chǎn)成本降低，能大規(guī)模應(yīng)用于生產(chǎn)，本項(xiàng)研究通過紫外線對(duì)該菌株進(jìn)行誘變處理，篩選出高效菌株，并對(duì)其液體和固體培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化，以提高其抑菌活性，同時(shí)對(duì)其產(chǎn)生的抑菌活性成分進(jìn)行分離提純及初步的性質(zhì)研究，為研制優(yōu)良生防制劑及其應(yīng)用開發(fā)奠定基礎(chǔ)，試驗(yàn)結(jié)果如下： 紫外線誘變處理后，經(jīng)過平板

2、初篩和搖瓶復(fù)篩，在40株誘變菌株中選育到高效Streptomycetes M1-8菌株，其對(duì)黃瓜枯萎菌抑菌圈直徑由12.8mm提高到了14.3mm。液體培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件進(jìn)行正交試驗(yàn)，結(jié)果表明：最適培養(yǎng)基配方為可溶性淀粉1％，玉米面1％，酵母膏1％，K<,2>HPO<,4> 0.12％，MgSO<,4> 0.08％，NaCl 0.08％，最適培養(yǎng)條件為：時(shí)間72h，溫度31℃，裝液量100mL/500mL，pH 7.5。優(yōu)化后其液體培

3、養(yǎng)液抑菌圈平均直徑增大到23.7mm，抑菌作用提高了73.6％。 Streptomycetes M1-8菌株固體培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件正交試驗(yàn)，結(jié)果表明：固體培養(yǎng)基配方為蚯蚓糞65％，玉米面20％，農(nóng)田土10％，豆餅粉5％，CaO濃度為0.4％；培養(yǎng)條件為：含水量為40％，時(shí)間6d，接菌量1.0 mL/100g(含孢子數(shù)10<'9>cfu/mL)； 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)表明，用固體發(fā)酵產(chǎn)物浸種黃瓜種子，其發(fā)芽率高于對(duì)照發(fā)芽率。通過

4、用不同含菌數(shù)的固體發(fā)酵產(chǎn)物處理后的土壤，培育長(zhǎng)出的幼苗在株高，鮮重，地上干重，根系干重等方面都表現(xiàn)出較好的促生長(zhǎng)作用，其中含菌數(shù)10<'6>cfu/g處理效果較明顯。 發(fā)酵液經(jīng)預(yù)處理、大孔樹脂柱層析、高效液相色譜等步驟，對(duì)菌株抑菌活性進(jìn)行了分離提純研究，在檢驗(yàn)波長(zhǎng)310nm時(shí)出現(xiàn)吸收峰，吸收峰峰形尖銳，對(duì)稱性好，雜峰較小，說明采用該種方法可較精確的檢測(cè)抑菌物質(zhì)成分及含量。通過紙層析，紙電泳等試驗(yàn)最后確定該農(nóng)用抗生素為弱堿性水溶性