miR159調(diào)節(jié)植物抗旱分子機(jī)理研究.pdf

1、干旱影響作物生長(zhǎng)發(fā)育和糧食生產(chǎn)安全。研究植物抗旱的分子機(jī)制，對(duì)培育抗旱品種并解決干旱問(wèn)題有重要的實(shí)際意義。miR159為調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要微小RNA，并位于ABA下游參與植物抗旱調(diào)節(jié)。然而，miR159-MYBs通路如何調(diào)控下游信號(hào)來(lái)響應(yīng)干旱的機(jī)制依然未知。本研究以擬南芥miR159缺失突變體以及miR159過(guò)表達(dá)植物為材料，通過(guò)ABA敏感性實(shí)驗(yàn)和干旱脅迫實(shí)驗(yàn)，結(jié)合熒光定量PCR、ChIP-qPCR和遺傳學(xué)等方法，對(duì)miR159調(diào)控

2、植物抗旱的分子機(jī)制進(jìn)行解析，取得了如下結(jié)果:
　　1.與Col-0相比，mir159ab雙突變體對(duì)ABA的敏感性和抗干旱能力明顯增加;干旱條件下，mir159ab雙突變體氣孔的閉合率明顯高于Col-0;熒光定量PCR結(jié)果顯示，mir159ab雙突變體中ABI5基因以及其下游基因EM1、RD19A、EM6等表達(dá)顯著上調(diào)。
　　2.構(gòu)建了mir159ab abi5-2三突變體。ABA敏感性實(shí)驗(yàn)表明，mir159ab abi5-2

3、三突變體對(duì)ABA的敏感性明顯降低，結(jié)果更趨向于abi5-2。表明在ABA敏感性表型上，abi5-2上位于mir159ab。
　　3.miR159靶基因MYB33的功能缺失降低了植物對(duì)ABA的敏感性，且myb33可以回復(fù)mir159ab對(duì)ABA的超敏感性，表明MYB33在miR159介導(dǎo)的ABA敏感性中起主要功能。
　　4.序列分析顯示，ABI5啟動(dòng)子上含有多個(gè)預(yù)測(cè)的MYB結(jié)合位點(diǎn)。進(jìn)一步ChIP-qPCR實(shí)驗(yàn)表明，MYB33