T細(xì)胞因子-4在人類結(jié)直腸癌和腺瘤組織中的表達(dá)研究.pdf

1、背景和目的：結(jié)直腸癌是常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，目前對(duì)于它的早期診斷及徹底根治還有眾多困難，5年生存率徘徊在50％左右。研究結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，對(duì)于尋找結(jié)直腸癌早期診斷的新指標(biāo)、探索新的治療方法、提高患者的生存率具有十分重要的意義。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展與.APC/β-Catenin/Tcf信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(Wnt通路)緊密相關(guān)。 Wnt通路對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的調(diào)控，是通過(guò)其核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子Tcf激活一系列靶基因的轉(zhuǎn)錄來(lái)

2、實(shí)現(xiàn)的。在缺乏信號(hào)刺激時(shí)，轉(zhuǎn)錄抑制因子CBP和CtBP與Tcf-4結(jié)合，封閉下游基因的轉(zhuǎn)錄。然而，當(dāng)Wnt信號(hào)激活時(shí)，上游信號(hào)分子β-catenin進(jìn)核后競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合Tcf-4，從而去除抑制作用，開啟靶基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。因此有研究者將Tcf家族視為Wnt通路的分子開關(guān)，認(rèn)為其參與了細(xì)胞癌變過(guò)程的調(diào)控。 Tcf-4在結(jié)腸上皮中高表達(dá)，被認(rèn)為是與結(jié)直腸腫瘤最相關(guān)的Tcf家族成員。目前對(duì)于Tcf-4的研究相對(duì)較少，主要集中在研究Tcf-4的

3、突變和活性調(diào)節(jié)方面，且大多數(shù)是基于腫瘤細(xì)胞系的體外實(shí)驗(yàn)研究。Tcf-4在人類結(jié)直腸腫瘤發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段有無(wú)表達(dá)變化?Tcf-4的表達(dá)與腫瘤部位，分化程度，Dukes分期等臨床病理特征的關(guān)系如何?體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的Tef-4多種異構(gòu)體蛋白是否能被在體實(shí)驗(yàn)所證實(shí)?這些問(wèn)題國(guó)內(nèi)外研究尚無(wú)明確報(bào)道。本研究室前階段實(shí)驗(yàn)證實(shí)了Tcf-4 mRNA在人類結(jié)直腸癌組織中表達(dá)增高。本實(shí)驗(yàn)利用免疫組織化學(xué)和Western blotting的方法檢測(cè)Tcf-4

4、蛋白在人類結(jié)直腸癌組織、腺瘤組織及正常粘膜中的表達(dá)，旨在闡明Tcf-4在以上三種組織中有無(wú)差異表達(dá)，并探討其表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。 方法：用免疫組織化學(xué)和Western blotting的方法檢測(cè)29例人類結(jié)直腸腺瘤標(biāo)本、31例結(jié)直腸癌標(biāo)本及31正常粘膜中Tcf-4的蛋白表達(dá)。使用人工評(píng)分和軟件圖像分析兩種方法對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果： 1.31例癌組織及29例腺瘤組織中Tcf-4蛋白的表達(dá)均分別

5、顯著高于正常粘膜。癌組織和腺瘤組織中Tcf-4的表達(dá)沒(méi)有顯著差異。 2.Tcf-4在不同Dukes分期的結(jié)直腸癌標(biāo)本中表達(dá)有顯著差異。Dukes分期越高的病例，Tcf-4表達(dá)也越高。腺瘤組織中Tcf-4.蛋白表達(dá)隨著非典型增生程度的增加而升高。 3.所有樣本中僅檢測(cè)出唯一分子量約為66kD的Tcf-4蛋白。 結(jié)論： 1.人類結(jié)直腸癌和腺瘤組織中Tcf-4的表達(dá)量顯著高于正常粘膜，非典型增生程度越重的腺瘤組