野生稻、栽培稻及其遠緣雜交后代的分子遺傳差異研究.pdf

1、本文應用序列多態(tài)性和長度多態(tài)性標記分析了野生稻(包括2個AA型野生稻和12個非AA型野生稻)和亞洲栽培稻(O.sativa L，以下簡稱栽培稻)葉綠體基因組的遺傳多態(tài)性，應用長度多態(tài)性標記(ISSR和SSR)分析了野生稻、栽培稻以及水稻種間遠緣雜交后代核基因組的遺傳多態(tài)性，進而探討了水稻的遺傳多樣性、種間親緣關系以及遠緣雜交(不同基因組型之間雜交)后代的遺傳規(guī)律。 主要結果如下： 1.葉綠體DNA遺傳多態(tài)性的研究用葉綠體

2、DNA兩個位點上的長度多態(tài)性片段標記(分別為 ORF100、ORF29-TrnC<'GCA>)對水稻葉綠體DNA進行秈粳特性分析，發(fā)現(xiàn)非AA型野生稻葉綠體DNA基本上都表現(xiàn)粳型特性。對2個多變區(qū)域(rps16基因內含子、TrnT <'UGU>-TrnL <'UAA>間區(qū))進行PCR擴增并測序，發(fā)現(xiàn)水稻種間葉綠體DNA具有豐富的多態(tài)性，利用這2個片段的多態(tài)性構建了反映水稻種間親緣關系的系統(tǒng)樹，并初步建立了水稻種間葉綠體DNA指紋圖譜。還利

3、用這2個多變區(qū)域具有秈粳分型標記作用的4個位點對非AA型野生稻葉綠體DNA的秈粳特性進行了進一步研究，其中3個表現(xiàn)粳型特性、1個表現(xiàn)部分秈型特性，但其與分型標記已不完全相同，產生了一定程度的變異。 2.核DNA遺傳多態(tài)性的研究從65對SSR引物中篩選出泳帶遷移率差異較大的11對SSR引物用于實驗。這11對SSR引物共檢測到104個多態(tài)性片段，平均每個基因座有等位基因 9.5個，材料平均遺傳距離為1.96(0.98～2.94)。從

4、43個ISSR引物中篩選出帶形清晰、多態(tài)性高的8個引物用于實驗。這8個引物從28個供試材料中擴增出多態(tài)性帶166條，平均每個引物出帶20.8條，材料平均遺傳距離為2.39(1.00～3.79)。兩種標記估算的遺傳距離呈顯著正相關，構建的親緣關系樹十分相似。 在11對SSR引物檢測到的104個多態(tài)性片段中，非AA型野生稻的特異性片段74條，占總片段數(shù)的71.2％。在8個ISSR引物檢測到的166條多態(tài)性片段中，非AA型野生稻的特異

5、性片段113條，占總片段數(shù)的68.7％。上述結果表明，水稻非AA基因組類型的核基因組遺傳多樣性豐富，且具有很多從基因組沒有的基因源，可以為水稻育種提供豐富的種質資源。 3.栽培稻×重穎野生稻[O.grrandiglumis(Doell)Prod]種間雜種及回交群體的構建與分析本研究通過幼胚拯救技術構建了栽培稻×重穎野生稻的種間雜種及回交后代群體，所得回交后代莖稈粗壯、生物量大，柱頭非常發(fā)達，部分株系清晨開花(早上6: 30 左右