大鼠急性心肌缺血再灌注損傷與解偶聯(lián)蛋白2表達的關系.pdf

1、目的：急性心肌缺血再灌注可引起心肌細胞線粒體內(nèi)活性氧增加并造成一系列損傷：脂質(zhì)過氧化、DNA損傷、細胞凋亡等等。近來研究表明：解偶聯(lián)蛋白2(UCP<,2>)廣泛存在于組織細胞的線粒體內(nèi)膜，具有抑制活性氧產(chǎn)生的功能。本實驗旨在探討急性缺血再灌注后心肌細胞線粒體內(nèi)膜解偶聯(lián)蛋白2表達的變化。 材料和方法：24只SD大鼠隨機分成3組(n=8)：①假手術組(Sham組)；②缺血再灌注后2小時組(2h組)；③缺血再灌注后6小時(6h組)。采

2、用結(jié)扎冠狀動脈前降支的方法造成大鼠心肌急性缺血，30 min后再通實行再灌注，分別于再灌注后2 h、6 h處死大鼠，用預冷的PBS洗凈殘血，分別用4％多聚甲醛固定及存放于-80℃冰箱收集各組大鼠心肌標本，用免疫組織化學和蛋白質(zhì)免疫印跡(western Blotting)的方法檢測各組心肌中解偶聯(lián)蛋白2．的表達。 結(jié)果：(1)結(jié)扎大鼠冠狀動脈前降支后心電圖可見ST-T改變。(2)假手術組心肌切片經(jīng)免疫組織化學染色細胞漿中未見UCP

3、<,2>表達，而缺血再灌注后2h、6h組心肌切片經(jīng)免疫組織化學染色可見細胞漿中棕黃色顆粒，UCP<,2>陽性細胞數(shù)明顯增多。(3)各組心肌細胞線粒體提取蛋白質(zhì)后，經(jīng)western Blotting檢測均可見UCP<,2>陽性蛋白雜交條帶，對各組條帶平均相對光密度進行定量分析，結(jié)果表明：缺血再灌注后線粒體的LJCP<,2>表達增高，與假手術組相比具有明顯差別(p<0.01)；6h組比2h組表達高(p(0.01)，差別明顯。 結(jié)論：