血管內(nèi)皮生長因子受體2遺傳變異與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，Ems，簡稱內(nèi)異癥）指具有活性的子宮內(nèi)膜腺體或間質(zhì)成分在子宮內(nèi)膜及子宮肌層以外出現(xiàn)、生長、浸潤、反復(fù)出血、可形成結(jié)節(jié)及包塊，引起疼痛和不育。子宮內(nèi)膜異位癥是婦科常見疾病，在育齡期婦女其發(fā)病率達(dá)10％。研究表明:在內(nèi)異癥的發(fā)病過程中，內(nèi)異癥病灶中血管生成及血液供應(yīng)起重要作用。新生血管形成是內(nèi)異癥病變形成中重要的環(huán)節(jié)，這一觀點(diǎn)基本被認(rèn)可。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular Endotheli

2、al Growth Factor，VEGF)是生理性及病理性血管生成最重要調(diào)節(jié)物，VEGF主要通過結(jié)合其酪氨酸激酶受體VEGFR-2發(fā)揮其促血管生成生物活性。本研究旨在探討VEGFR-2基因上的單核苷酸多態(tài)性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs）位點(diǎn)與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，其結(jié)果可能從基因水平進(jìn)一步探討內(nèi)異癥的發(fā)病機(jī)制，并為其預(yù)防及診治提供重要理論依據(jù)。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)采用病例-對照

3、研究，分析VEGFR-2基因上的遺傳變異與內(nèi)異癥發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。研究對象包括571例內(nèi)異癥患者（病例組），580例健康對照個體（對照組）。采集研究對象的外周靜脈血5ml，采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA。根據(jù)HapMap數(shù)據(jù)庫中VEGFR-2基因上的中國北方漢族人群的數(shù)據(jù)，利用Haploview軟件，通過htSNPs（haplotype tag Single Nucleotide Polymorphisms）的方

4、法對VEGFR-2基因上的SNP位點(diǎn)進(jìn)行篩選，最終確定了5個多態(tài)性位點(diǎn):+1192C/T(rs2305948)、+1719T/A(rs1870377)、IVS6+54C/T(rs7692791)、IVS25-92G/A(rs1531289)和+31C/T(rs7667298)。采用聚合酶鏈反應(yīng)和連接酶檢測反應(yīng)(polymerase chain reaction-ligase detection reaction，PCR-LDR)技術(shù)，檢

5、測病例組和對照組單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)的基因型和等位基因型頻率分布情況。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0版軟件包(SPSSCompany，Chicago，Illinois，USA)進(jìn)行分析，P＜0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病例組和對照組的年齡差異采用t檢驗(yàn)。對照組基因型頻率分布行x2檢驗(yàn)，進(jìn)行Hardy-weinberg平衡分析。比較病例組和對照組各位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布采用x2檢驗(yàn)。以非條件Logistic回歸方法計(jì)算相對風(fēng)險(xiǎn)度

6、的比值比(odds ratio，OR)及其95％可信區(qū)間(confidenceinterval，CI)。
　　結(jié)果:
　　1.內(nèi)異癥患者的年齡與其對照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示對照組中VEGFR-2基因上的5個多態(tài)位點(diǎn)的基因型頻率分布均符合Hardy-weinberg平衡(P＞0.05)。
　　2.VEGFR-2基因+1192C/T多態(tài)的C和T等位基因頻率在對照組和內(nèi)異癥組分別為:86.0

7、％，14.0％和89.3％，10.7％，兩組相比存在明顯差異(P=0.017)。與C/C基因型相比，C/T+T/T基因型的攜帶者內(nèi)異癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯降低，OR值為0.75(95％CI=0.57-0.99)。
　　3.VEGFR-2基因+1719T/A多態(tài)的T/T，T/A，A/A三種基因型頻率在對照組和內(nèi)異癥組中分別為:30.2％，50.7％，19.1％和30.3％，49.0％，20.7％，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.780);T和A

8、等位基因頻率分別為:55.5％，44.5％和54.8％，45.2％，兩組相比無差異(P=0.735)。
　　4.VEGFR-2基因+31C/T多態(tài)的C/C，C/T，T/T三種基因型頻率在對照組和內(nèi)異癥組中分別為:41.4％，47.6％，11.0％和42.2％，48.3％，9.5％，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.677);C和T等位基因頻率分別為:65.2％，34.8％和66.4％，33.6％，兩組相比無差異(P=0.543)。

9、　　5.VEGFR-2基因-92G/A多態(tài)的G/G，G/A，A/A三種基因型頻率在對照組和內(nèi)異癥組中分別為:62.6％，33.8％，3.6％和65.7％，31.0％，3.3％，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.551);G和A等位基因頻率分別為:79.5％，20.5％和81.2％，18.8％，兩組相比無差異(P=0.308)。
　　6.VEGFR-2基因+54T/C多態(tài)的T/T，T/C，C/C三種基因型頻率在對照組和內(nèi)異癥組中分別為:34

10、.7％，49.7％，15.7％和36.6％，46.4％，17.0％，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.540);T和C等位基因頻率分別為:59.5％，40.5％和59.8％，40.2％，兩組相比無差異(P=0.955)。
　　結(jié)論:VEGFR-2基因外顯子7區(qū)+1192C/T多態(tài)性位點(diǎn)可能與中國北方漢族婦女子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，與C/C基因型相比，C/T+T/T基因型的攜帶者子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯降低。VEGFR-2基因+1