青蒿的組織培養(yǎng)及其四倍體育種.pdf

1、中藥青蒿即黃花蒿(ArtemisiaannuaL.)，與分類學(xué)上的青蒿(Artemisiaapiacea)同屬菊科(AsteraeeaeorCompositae)蒿屬(Artemisia)。從青蒿中分離出的青蒿素是目前所有抗瘧藥中起效最快、療效最好、毒性最低的藥物。然而，目前青蒿中的青蒿素含量普遍偏低，為了提高青蒿藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量，我們利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行了青蒿組織培養(yǎng)體系的建立及其同源四倍體育種的研究，旨在選育出有效成分含量高，葉部和

2、花部藥材產(chǎn)量高的優(yōu)良品種，從而使多倍體所具有的根、莖、葉的巨型性在藥材生產(chǎn)中得以充分利用。 1建立并優(yōu)化了青蒿組織培養(yǎng)下快速繁殖體系進(jìn)行了青蒿愈傷組織的誘導(dǎo)，愈傷組織的分化，試管苗的擴(kuò)大繁殖及生根試驗(yàn)，結(jié)果顯示青蒿花序和幼葉在MS+BA0.5mgL-1+NAA1.0mgL-1培養(yǎng)基上能較快地誘導(dǎo)出愈傷組織，誘導(dǎo)率可達(dá)80％以上，且誘導(dǎo)出的愈傷組織在MS+BA8.0mgL-1+IAA1.0mgL-1的培養(yǎng)基上能夠分化出健壯的綠苗，

3、分化率為20％，青蒿叢生芽在MS+BA2.0mgL-1+KT2.0mgL-1的培養(yǎng)基上能有效地進(jìn)行快繁，在生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA1.0mgL-1上，試管苗生根率可達(dá)100％。 2優(yōu)化了青蒿染色體壓片技術(shù)對(duì)青蒿試管苗根尖染色體顯微鑒定的制片方法進(jìn)行了優(yōu)化試驗(yàn)，確立了較好的染色體顯微鑒定技術(shù)和程序，并有效地應(yīng)用于四倍體株系的檢出。 3在組織培養(yǎng)條件下進(jìn)行了青蒿同源四倍體誘導(dǎo)技術(shù)的研究在培養(yǎng)基中添加一定濃度的秋水仙素，或

4、者把青蒿叢生芽經(jīng)一定濃度的秋水仙素溶液浸泡一定時(shí)間后再進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果表明，均可誘發(fā)青蒿四倍體的產(chǎn)生，其中以先用0.05％秋水仙堿浸泡，然后在含50mgL-1秋水仙堿的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，這一組合條件雖然青蒿試管苗存活率最低，但四倍體誘導(dǎo)率最高，達(dá)到69.2％。 4通過優(yōu)化的根尖染色體顯微鑒定條件，鑒定出了10個(gè)同源四倍體株系從中選擇了6個(gè)根莖粗大、枝葉繁茂、生長(zhǎng)旺盛的四倍體株系作為進(jìn)一步育種的材料加速快繁用于田間對(duì)比試驗(yàn)。 5

5、對(duì)青蒿四倍體各株系及原二倍體植株的試管苗進(jìn)行了移栽試驗(yàn)青蒿試管苗在適宜的溫濕條件下移栽效果較好，結(jié)果表明，成活率可達(dá)85.8％以上。 6對(duì)各株系生長(zhǎng)情況、農(nóng)藝性狀進(jìn)行了初步觀察記載結(jié)果顯示，四倍體植株和原青蒿二倍體植株相比，各種農(nóng)藝性狀均發(fā)生了明顯的變化：四倍體植株的葉子明顯比二倍體親本大而厚；而且生長(zhǎng)勢(shì)旺，葉、花序藥材比二倍體粗大，顯示了一般多倍體植株所表現(xiàn)的典型性狀——巨型性。 7對(duì)青蒿四倍體和二倍體進(jìn)行了青蒿素含量