甜瓜雙單倍體、同源四倍體育種材料的創(chuàng)制及相關(guān)研究.pdf

1、通過秋水仙素溶液處理離體的甜瓜(Cucumis meloL.)‘4810’的單倍體芽，誘導(dǎo)獲得了雙單倍體，通過二倍體甜瓜未成熟胚子葉組織培養(yǎng)誘導(dǎo)細(xì)胞無性系變異獲得了齊甜一號(hào)甜瓜的同源四倍體材料。對(duì)甜瓜雙單倍體的生理生化特性及同源四倍體的品質(zhì)、染色體行為、育性方面進(jìn)行初步測定研究，并探討了兩種甜瓜倍性材料的離體繁殖條件。 1.雙單倍體甜瓜的創(chuàng)制及其初步定性研究 通過秋水仙素溶液離體浸泡和秋水仙素加入培養(yǎng)基離體培養(yǎng)甜瓜單倍體

2、芽兩種方法誘導(dǎo)雙單倍體，結(jié)果表明：濃度為0.025％的秋水仙素溶液浸泡8h效果較好，加倍率為13.7％。 對(duì)單倍體、雙單倍體進(jìn)行了形態(tài)及部分生理生化特性的定性研究比較，結(jié)果顯示：形態(tài)上雙單倍體葉、莖、花等明顯比單倍體大，與二倍體相近；雙倍體葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素含量、可溶性蛋白質(zhì)含量均高于單倍體，可溶性糖含量與單倍體無顯著差異。單倍體、雙單倍體的EST同工酶譜表現(xiàn)純合，比二倍體少二條帶。 2.同源四倍體甜瓜的創(chuàng)制及

3、其初步定性研究 通過未成熟胚子葉的組織培養(yǎng)創(chuàng)造體細(xì)胞無性系變異，6個(gè)基因型的甜瓜品種未成熟胚子葉培養(yǎng)過程中.外植體分化頻率、變異率、加倍率隨基因型，激素濃度不同而存在著較大差異.本試驗(yàn)中誘導(dǎo)出了齊甜一號(hào)的同源四倍體甜瓜，激素濃度以BA3.0mg/L為佳，加倍率為14.3％.對(duì)再生的同源四倍體及二倍體甜瓜植株進(jìn)行了莖、葉、花、果實(shí)、種子的形態(tài)觀察，及各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)和主要品質(zhì)指標(biāo)的測定。結(jié)果表明：除果形指數(shù)變小外，四倍體植株的莖、葉、

4、花、果實(shí)、種子的各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)的值均顯著大于二倍體。同時(shí)，四倍體甜瓜的Vc含量、可溶性糖含量也顯著高于二倍體。 以同源四倍體甜瓜為材料，采用常規(guī)壓片法研究花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂行為。發(fā)現(xiàn)同源四倍體甜瓜花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂過程與二倍體基本相同但有其特殊性。主要表現(xiàn)在：粗線期觀察到有6.7％的出現(xiàn)雙核的細(xì)胞，終變期染色體構(gòu)型復(fù)雜，多數(shù)細(xì)胞含有二價(jià)體、多價(jià)體、三價(jià)體和單價(jià)體；中期Ⅰ和中期Ⅱ有赤道板外的染色體；后期Ⅰ出現(xiàn)染色體橋；后期Ⅰ和后期Ⅱ

5、出現(xiàn)落后染色體。四分體時(shí)期出現(xiàn)二分體、三分體、多分體等。同源四倍體甜瓜與二倍體相比，雄花花粉活力顯著降低，且四孔花粉粒較多，雌花坐果率也顯著降低。因此，花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂異常及雌雄配子育性較差是同源四倍體甜瓜育性低的細(xì)胞學(xué)原因。 3.雙單倍體、四倍體甜瓜的離體繁殖條件的探索 為建立甜瓜雙單倍體、同源四倍體的離體繁殖體系，本研究探索了甜瓜雙單倍體、同源四倍體的離體繁殖條件。結(jié)果表明：雙單倍體、同源四倍體的增殖和伸長的最佳培