黃瓜同源四倍體的創(chuàng)制及不同倍性材料的相關(guān)研究.pdf

1、通過(guò)秋水仙素水溶液處理普通黃瓜(Cucumis sativus L.)，獲得了8種基因型的同源四倍體黃瓜，四倍體‘P01’自交留種后可獲得飽滿種子。對(duì)二倍體衍生出來(lái)的單倍體、四倍體進(jìn)行減數(shù)分裂染色體行為、育性方面的相關(guān)研究及不同倍性材料DNA基礎(chǔ)上遺傳差異比較。 1．黃瓜同源四倍體的創(chuàng)制及其育性穩(wěn)定性 在室溫條件下，通過(guò)用0.4％的秋水仙素水溶液處理黃瓜已萌動(dòng)種子4h，獲得8種基因型的黃瓜同源四倍體材料；其中，四倍體‘P

2、01’自交后得到了飽滿種子。新合成的同源四倍體的側(cè)枝數(shù)減少、葉柄變短、葉面積增大、花器變大，存在一定比率的4孔花粉粒，與以前所得的四倍體類似；但其4孔花粉粒的比率較高(29-54.7％)，花粉可染率、萌發(fā)率均顯著提高。表明新合成的四倍體的育性較高。 2．黃瓜單倍體減數(shù)分裂及育性研究 以3種基因型單倍體黃瓜(2n=x=7)為材料，比較研究減數(shù)分裂染色體的行為特征和雌雄配子的育性。與二倍體相比，單倍體花粉母細(xì)胞中染色體主要以

3、單價(jià)體存在，3種單倍體平均染色體構(gòu)型公式為：2n=x=6.22Ⅰ+0.37Ⅱ+0.01Ⅲ，32.85％和花粉母細(xì)胞可以觀察到二價(jià)體。終變期，核仁周圍有2-4條NOR染色體。中期Ⅰ染色體以3種排列方式分布在細(xì)胞中。后期Ⅰ染色體主要以(4+3)形式分向兩極，并且經(jīng)常出現(xiàn)滯后、游離及斷裂等異常分離行為。后期Ⅱ主要發(fā)生染色單體分離。黃瓜單套單倍體減數(shù)分裂染色體行為與二倍體明顯不同。單倍體染色體組內(nèi)部分染色體間有同源性。 研究發(fā)現(xiàn)，H1單

4、倍體花粉沒(méi)有活力；H2花粉染色率為2.26％，子房可發(fā)育形成果實(shí)，但胚敗育不能形成種子；H3雌配子有育性，胚能夠發(fā)育完全，培養(yǎng)后可獲得植株。單倍體7條染色體的姊妹染色單體在后期Ⅱ均可發(fā)生分離，并且減數(shù)分裂過(guò)程中有八字形等異常紡錘體的出現(xiàn)。減數(shù)分裂后可形成單分孢子到九分孢子，其中四分孢子的比例在各基因型單倍體中均最高。H3單倍體二分孢子、三分孢子的形態(tài)異常，比例分別達(dá)19.37％和19.72％，接近四分孢子比例。單倍體雌雄配子的育性因基因

5、型而異。其育性的形成可能是7條染色體在后期Ⅱ發(fā)生全部染色單體分離的過(guò)程中，紡錘體由十字型變異成八字形的結(jié)果。 3．黃瓜不同倍性材料遺傳差異的AFLP分析 采用AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)技術(shù)對(duì)黃瓜(Cucumis sativusL.)品種‘津綠4號(hào)’的單倍體、二倍體和四倍體進(jìn)行基因組DNA多態(tài)性比較。從35對(duì)引物擴(kuò)增獲得2188條60-500Do的條帶，但多態(tài)性