針灸對環(huán)磷酰胺(CTX)化療荷瘤小鼠脾臟組織中白細胞介素-12(IL-12)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量影響的研究.pdf

1、目的：本課題以環(huán)磷酰胺（CTX）抑制荷瘤小鼠免疫功能為切入點，通過觀察針灸對CTX化療S180荷瘤小鼠脾臟指數(shù)以及對脾臟組織中白介素-12（IL-12）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量的影響，揭示針灸改善S180荷瘤小鼠化療所致免疫功能損傷的分子生物學(xué)機制。
　　方法：在無菌操作臺中，取S180肉瘤種鼠腹水，經(jīng)生理鹽水3倍稀釋，取0.3ml細胞稀釋液接種于消毒后的正常小鼠下腹腹腔，每7天傳代1次。在無菌操作臺中抽取生長良好的S

2、180荷瘤小鼠腹水，用生理鹽水配制成5×106個/ml的細胞懸液，將體重22±2g的健康7周齡雄性昆明小鼠按0.2ml/只的計量接種于常規(guī)皮膚消毒后的正常小鼠左前肢腋部皮下。觀察5天，至左腋下可觸及5～6mm大小肉瘤為植瘤成功。按照荷瘤小鼠體重隨機分為荷瘤空白組、荷瘤模型組、荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組。荷瘤空白組注射同等劑量的生理鹽水，其余3組按150mg/kg/d腹腔注射CTX溶液，依據(jù)藥代動力學(xué)注射4h后造模成功。在模型建立成功后同一時

3、間段，荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組分別取“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”予以針刺、艾灸治療，荷瘤空白組、荷瘤模型組陪同固定，每天在相同時間段進行治療。治療3天、5天后的第2天分別處死一批小鼠，取出完整脾臟，稱重后勻漿。用ELISA檢測法檢測脾臟組織中IL-12和TNF-α含量。數(shù)據(jù)采用SPSS19.0 for Windows統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行分析。
　　結(jié)果：1、治療3天后，除荷瘤空白組外，荷瘤模型組、荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組

4、脾臟指數(shù)均降低，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組脾臟指數(shù)高于荷瘤模型組，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤艾灸組脾臟指數(shù)雖高于荷瘤針刺組，但無顯著性差異（P>0.05）；治療5天后，荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組化療荷瘤小鼠脾臟指數(shù)高于荷瘤模型組，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組脾臟指數(shù)雖高于荷瘤艾灸組，但無顯著性差異（P>0.05）。
　　2、治療3天后，除荷瘤空白組外，荷瘤模型組、荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組化療

5、荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12含量均降低，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組化療荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12含量高于荷瘤模型組，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組脾臟組織中IL-12含量高于荷瘤艾灸組，但無顯著性差異（P>0.05）；治療5天后，荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組化療荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12含量均高于荷瘤模型組，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組的脾臟組織中IL-12含量雖高于荷瘤艾灸組，但無顯著性差

6、異（P>0.05）。
　　3、治療3天后，除荷瘤空白組外，荷瘤模型組、荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組小鼠脾臟組織中TNF-α含量均降低，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組、荷瘤艾灸組化療荷瘤小鼠脾臟組織中TNF-α含量高于荷瘤模型組，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤艾灸組的脾臟組織中TNF-α含量雖高于荷瘤針刺組，但無顯著性差異（P>0.05）；治療5天后，除荷瘤空白組外，其余各組化療荷瘤小鼠脾臟組織TNF-α含量均上升，尤以荷瘤

7、針刺組、荷瘤艾灸組脾臟組織中TNF-α含量上升較為明顯，有顯著性差異（P＜0.05），荷瘤針刺組的脾臟組織中TNF-α含量雖高于荷瘤艾灸組，但無顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：1、針灸對CTX化療荷瘤小鼠脾臟損傷可起到保護和修復(fù)作用。結(jié)果顯示，CTX化療可降低荷瘤小鼠脾臟指數(shù)。而針刺和艾灸可以提高化療荷瘤小鼠的脾臟指數(shù)，能夠改善因CTX化療后引起的免疫功能損傷。治療3天荷瘤艾灸組優(yōu)于荷瘤針刺組，治療5天荷瘤針刺組優(yōu)于荷瘤艾

8、灸組。
　　2、針灸對CTX化療荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12的含量有一定的影響。CTX化療引起荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12的含量的下降。而針刺和艾灸均可以提高化療荷瘤小鼠脾臟組織中IL-12的含量。治療3、5天荷瘤針刺組均優(yōu)于荷瘤艾灸組。
　　3、針灸對CTX化療荷瘤小鼠脾臟組織中TNF-α的含量有一定的影響。CTX化療引起荷瘤小鼠脾臟組織中TNF-α的含量的下降。而針刺和艾灸均可以提高化療荷瘤小鼠脾臟組織中TNF-α含量。

9、治療3天荷瘤艾灸組優(yōu)于荷瘤針刺組，治療5天荷瘤針刺組優(yōu)于荷瘤艾灸組，針刺比艾灸提高化療荷瘤小鼠脾臟組織中TNF-α含量更明顯。
　　實驗結(jié)果表明，針灸可以提高CTX化療荷瘤小鼠脾臟指數(shù)及脾臟組織中IL-12和TNF-α的含量，從而減輕化療所致的免疫功能損傷。結(jié)合導(dǎo)師組前期的研究成果，證實針灸不僅可以改善化療引起的骨髓抑制，促進造血干細胞的分裂增殖，提升白細胞，增強機體的免疫功能，而且還能通過對化療所致免疫器官脾臟損傷的修復(fù)以及對白