脂質(zhì)體介導(dǎo)NF-κB decoy ODN對大鼠重癥急性胰腺炎的影響.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文脂質(zhì)體介導(dǎo)NFκBdecoyODN對大鼠重癥急性胰腺炎的影響姓名：鐘榮德申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)肝膽外科指導(dǎo)教師：周杰20070601中文摘要14電泳遷移率變動分析法(EMSA)檢測胰腺、肝臟、肺臟組織的NFrB活性。15電泳遷移率變動分析法檢測NFzB誘捕物雙鏈寡聚脫氧核苷酸和NFrB特異探針分別與NF心結(jié)合情況比較。試驗分組如下：第一組陰性對照組不加任何核蛋白提取物(n=lo)；第二組反應(yīng)系為核蛋白提取

2、物加生理鹽水(n=lo)；第三組反應(yīng)系為核蛋白提取物加100倍特異性標(biāo)記的NFrB探針伍=10)；第四組反應(yīng)系為核蛋白提取物加100倍非特異性未標(biāo)記的SPl探針(n=10)；第五組反應(yīng)系為核蛋白提取物加decoyODN(n=10)；第六組反應(yīng)系為核蛋白提取物加錯配ODN(n=10)。所有核蛋白提取物均從生理鹽水組提取。’2脂質(zhì)體介導(dǎo)NF詔decoyODN對重癥急性胰腺炎大鼠肺、肝和胰腺炎癥因子mRNA表達(dá)和早期器官損傷的影響21以5％牛

3、磺膽酸鈉制作重癥急性胰腺炎大鼠模型。22SpragueDawley(SD)大鼠分組如下：假手術(shù)對照組為開腹翻動胰腺，未作任何處理組(n=10)；裸ODN組(n=lo)；生理鹽水組(n=lo)；脂質(zhì)體／錯配ODN復(fù)合物組(n=10)；脂質(zhì)J4k／decoyODN復(fù)合物組(n=lO)。脂質(zhì)體，ODN復(fù)合物或裸ODN101tl／g，生理鹽水lml，分別于SAP模型建立后lh經(jīng)尾靜脈注射。各組均在注射4h后，經(jīng)腹主動脈抽取血樣本進(jìn)行血?dú)夥治?P

4、02)、淀粉酶檢測，下腔靜脈抽取血樣本進(jìn)行ALT和AST檢測，以上生化檢查由南方醫(yī)院檢驗科檢測；用斷頭法處死大鼠，立刻切取胰腺、肝臟、肺臟組織標(biāo)本，并置于液氮中保存；另取大鼠肺、胰腺組織標(biāo)本，進(jìn)行肺、胰腺組織濕／干重比值測定；另取肺、胰腺組織標(biāo)本，進(jìn)行肺、胰腺組織髓過氧化物酶(MPO)活性測定。23電泳遷移率變動分析法檢測胰腺、肝臟、肺臟組織的NFrB活性。24電泳遷移率變動分析法檢測NFrB誘捕物雙鏈寡聚脫氧核苷酸和NFrB特異探針分