荷H22型肝癌昆明小鼠異體皮膚移植后觸發(fā)抗腫瘤免疫的初步研究.pdf

1、原發(fā)性肝癌(Hepato-cellular carcinoma，HCC)患者免疫功能降低已得到證實(shí)，同時(shí)細(xì)胞免疫功能制約著肝癌的發(fā)生發(fā)展。臨床上如何改善患者的細(xì)胞免疫功能是肝癌治療的重要環(huán)節(jié)之一。 研究表明，異體皮膚移植可以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)移植物的急性排斥反應(yīng)，由于移植與腫瘤細(xì)胞都表達(dá)人白細(xì)胞抗原(HLA)，而移植物皮膚與腫瘤組織相對(duì)于受者均是異物，所以理論上，機(jī)體產(chǎn)生的抗移植物排斥反應(yīng)對(duì)腫瘤組織也有效。本課題試圖在接種H22型

2、肝癌細(xì)胞的昆明小鼠身上進(jìn)行異體皮膚移植，激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生適當(dāng)?shù)募毙耘懦夥磻?yīng)，探討利用這種宿主抗異物的免疫反應(yīng)能否達(dá)到治療腫瘤的目的。為此，本文研究如下內(nèi)容：1．觀察異體皮膚移植組與對(duì)照組昆明小鼠腫瘤組織生長(zhǎng)情況(重量)的差異，同時(shí)用TUNEL(缺口末端標(biāo)記技術(shù))染色法觀察異體皮膚移植組H22型肝癌昆明小鼠腫瘤組織與對(duì)照組腫瘤組織肝癌細(xì)胞凋亡情況的差異；2．觀察異體皮膚移植組與對(duì)照組昆明小鼠外周血淋巴細(xì)胞亞群的差異。 方法：入選同種異

3、基因皮膚移植組荷H22型肝癌細(xì)胞的昆明小鼠15只(治療組1)，同種同基因的皮膚移植組荷H22型肝癌昆明小鼠15只(對(duì)照組1)，未治療荷H22型肝癌昆明小鼠10只(對(duì)照組2)。皮膚移植后7天后眼球采血法采集外周血，處死小鼠并剝離腫瘤組織稱(chēng)重。利用TUNEL染色法觀察治療組與未治療組肝癌細(xì)胞的凋亡數(shù)量并計(jì)數(shù)，同時(shí)利用流式細(xì)胞儀技術(shù)對(duì)四組昆明小鼠的外周血的CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞、NK1.1+的NK細(xì)胞

4、的百分比和數(shù)量進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果：異體皮膚移植后，同種異基因皮膚移植組腫瘤重量與對(duì)照組有明顯差異(P＜0.05)，同種同基因皮膚移植組與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)；同種異基因、同基因皮膚移植組肝癌細(xì)胞凋亡數(shù)與對(duì)照組相比均有明顯差異(P＜0.05)；外周血淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量功能檢測(cè)差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論：同種異基因皮膚移植對(duì)小鼠H22肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用，這種作用可能通過(guò)誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡