葡聚糖磁流體熱處理對(duì)小鼠肝癌（H22）移植瘤生長(zhǎng)的影響.pdf

1、本文研究目的：觀察用葡聚糖包覆的水基磁流體(葡聚糖磁流體)直接瘤內(nèi)注射，進(jìn)行磁熱處理，對(duì)小鼠H22移植瘤生長(zhǎng)的影響并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 研究方法：用化學(xué)共沉淀法，以葡聚糖水溶液作為分散劑，制備葡聚糖磁流體。檢測(cè)交變磁場(chǎng)作用下，葡聚糖磁流體在體內(nèi)、體外的升溫情況。觀察葡聚糖磁流體皮下注射引起的急性毒性和刺激性。將接種了H22肝癌細(xì)胞的小鼠隨機(jī)分組：(1)組注射生理鹽水不加磁場(chǎng)，(2)組注射生理鹽水加20kA/m磁場(chǎng)10min，

2、(3)組注射葡聚糖磁流體不加磁場(chǎng)，(4)組注射葡聚糖磁流體加20kA/m磁場(chǎng)10min，(5)組注射葡聚糖磁流體加17.78kA/m磁場(chǎng)10min，(6)組注射葡聚糖磁流體加15.56kA/m磁場(chǎng)10min，(7)組注射葡聚糖磁流體加20kA/m磁場(chǎng)5min，(8)組注射葡聚糖磁流體加20kA/m磁場(chǎng)3min。再設(shè)(1)-(6)組，如前法處理，處理3天后各組再次注射，重復(fù)處理一次。處理兩周后處死動(dòng)物，稱瘤重，計(jì)算抑瘤率。另兩組動(dòng)物分別瘤

3、內(nèi)注射葡聚糖磁流體和等體積鹽水，作為處理組和對(duì)照組，在經(jīng)磁場(chǎng)處理后1h，5h，24h，48h和336h處死。用免疫組化染色和流式細(xì)胞分析的方法檢測(cè)瘤組織的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)；用原位凋亡和流式細(xì)胞分析的方法，判斷瘤組織的凋亡狀況。 研究結(jié)果：葡聚糖磁流體中鐵氧體粒子的平均直徑為15nm左右，在室溫靜置72h以上，沒(méi)有分層現(xiàn)象。葡聚糖磁流體在磁場(chǎng)中的升溫速率與鐵氧體的濃度和磁場(chǎng)強(qiáng)度成正線性相關(guān)。磁場(chǎng)強(qiáng)度一定時(shí)，葡聚糖磁

4、流體的SAR值與鐵氧體濃度成負(fù)線性相關(guān)；鐵氧體濃度一定時(shí)，葡聚糖磁流體的SAR值與磁場(chǎng)強(qiáng)度成正線性相關(guān)。磁流體的升溫速率和SAR值與葡聚糖分子量和濃度無(wú)關(guān)。瘤內(nèi)及瘤周注射24.16mg/0.2ml葡聚糖磁流體在55kHz，20kA/m磁場(chǎng)中作用10min，移植瘤內(nèi)溫度可以達(dá)到并維持在46℃左右，而注射相同體積生理鹽水的移植瘤，溫度幾乎沒(méi)有變化。葡聚糖磁流體注射小鼠皮下，LD50為4409.61±514.93mg/kg。皮下注射30mg/

5、0.3ml葡聚糖磁流體24h后可見(jiàn)皮下血管擴(kuò)張和注射部位的白細(xì)胞浸潤(rùn)，72h后反應(yīng)基本消失。注射30mg/0.3ml油酸鈉磁流體后7天左右可引起注射部位皮膚潰破、脫落。接種了H22腫瘸細(xì)胞的小鼠進(jìn)行一次磁熱處理后，第1到第8組的瘸重依次為：5.45±1.48g、4.62±2.67g、3.68±1.79g、2.19±1.89g、3.68±2.42g、4.92±2.66g、3.12±2.17g和3.52±1.24g。與第1組比較，第4、5、

6、7、8組抑瘤率均大于30％，其中第4組與第1組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。經(jīng)兩次磁熱處理后，第1到第6組的瘤重依次為：2.71±1.73g，2.39±2.07g，1.57±1.81g，0.37±0.54g，0.31±0.25g，0.95±0.98g。與前三組比較，第4到第6組的抑瘤率均大于30％，與第1組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。磁熱處理后不同時(shí)間，處理組腫瘤組織的VEGF表達(dá)和凋亡狀況與對(duì)照組的比較差異均無(wú)顯著性。