冬凌草甲素通過下調(diào)NF-κB、XIAP表達(dá)增強(qiáng)吉西他濱對胰腺癌SW1990的抑瘤效應(yīng).pdf

1、論文題目：冬凌草甲素通過下調(diào)NFKB、XIAP表達(dá)增強(qiáng)吉西他濱對胰腺癌SWl990的抑瘤效應(yīng)答辯委員會(huì)主席：基迄益遂￡至逝曼么遂2答辯委員會(huì)成員：茸盈之拯擅【啤i瑙厶氬啦2生顯盜益罐』齟垴岫瑙蝴論文答辯日期矽J羅年羅月涉日溫少li醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文冬凌草甲素通過下調(diào)NFKB、XIAP表達(dá)增強(qiáng)吉西他濱對胰腺癌$W1990的抑瘤效應(yīng)中文摘要目的探討冬凌草甲素在體外能否增強(qiáng)吉西他濱對胰腺癌細(xì)胞的抑瘤效應(yīng)及其可能的作用機(jī)制。方法采用不同濃度的

2、冬凌草甲素(0pM，10HM，20uM，40uM，80uM，160uM)分別處理胰腺癌SWl990細(xì)胞24h，48h，72h后，CCK一8法檢測胰腺癌細(xì)胞株SWl990細(xì)胞的增殖情況，流式檢測細(xì)胞周期分布情況，并選擇一個(gè)最合理的冬凌草甲素藥物濃度：進(jìn)一步采用冬凌草甲素(40uM)與吉西他濱(20uM)分別單獨(dú)及聯(lián)合處理胰腺癌S冒1990緬施48小時(shí)，并設(shè)立對黑組，CCK一8法檢測各處理組SWl990細(xì)胞的存活率；AnnexinVFITC

3、／PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測各處理組細(xì)胞凋亡情況；Westernblot檢測各處理組SWl990細(xì)胞中NF—KB和XIAP(X1inkedinhibitorofapoptosisprotein)蛋白的表達(dá)水平；RT—PCR檢測SWl990細(xì)胞中NFKB和XIAP基因的表達(dá)水平。結(jié)果不同濃度冬凌草甲素處理SWl990細(xì)胞后，CCK一8檢測細(xì)胞增殖，結(jié)果可見：SWl990細(xì)胞生長抑制率不但隨藥物濃度的增加逐漸升高，亦隨著處理時(shí)間的延長而升高，有

4、明顯的劑量和時(shí)間依賴性；40umol／L冬凌草甲素作用48h后，細(xì)胞抑制率接近50％；流式檢測細(xì)胞周期分布，結(jié)果可見：與對照組相比，冬凌草甲素組G，期細(xì)胞比例明顯增加，并且隨著冬凌草甲素濃度的增高，G。期細(xì)胞比例亦隨著增高。冬凌草甲素單獨(dú)及聯(lián)合吉西他濱處理細(xì)胞后，’CCK8檢測細(xì)胞增殖，聯(lián)合組細(xì)胞的存活率為2563％，與吉西他濱組(4375％)和冬凌草甲素組(4782％)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；流式細(xì)胞術(shù)檢測各處理組細(xì)胞凋亡，吉西他濱

5、與冬凌草甲素單獨(dú)作用時(shí)，SWl990細(xì)胞的凋亡率分別為21％和324％，而聯(lián)合組SWl990細(xì)胞的凋亡率為567％，較其余各組細(xì)胞的凋亡率增加更明顯(P001)；表明冬凌草甲素和吉西他濱對SWl990細(xì)胞增殖抑制及促凋亡均有協(xié)同作用。冬凌草甲素單獨(dú)及聯(lián)合吉西他濱處理細(xì)胞后，Westernblot檢測各處理組NFKB和XIAP的蛋白表達(dá)，吉西他濱能上調(diào)SWl990細(xì)胞中NFKB和XIAP蛋白的表達(dá)(尸005)，冬凌草甲素單藥、冬凌草甲素聯(lián)