P53和Bcl-2在大鼠SAH后早期腦損傷中的表達及意義.pdf

1、前言
　　 蛛網膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage SAH)發(fā)生率在西方國家約10人/10萬人，腦血管痙攣和早期腦損傷是患者致死和致殘的主要因為，約12.4％患者在入院前已發(fā)生猝死，出血48小時內的死亡率高達40％-60％，約35％在SAH后24小時內死亡?；颊咧滤?、致殘的主要因為是出血后的腦血管痙攣(cerebralvasospasm，CVS)和早期腦損傷(early brain injury，EBI)

2、。早期腦損傷病理生理學包括血腦屏障(BBB)的破壞、腦水腫及神經細胞凋亡，凋亡受到多種相關基因的調控，這些基因已經被證實在早期腦損傷和遲發(fā)性血管痙攣血管壁和腦組織中存在表達。P53和Bcl-2則被認為是抑制和促進細胞凋亡最重要的基因。延緩或阻止凋亡的發(fā)生和發(fā)展，有望為腦血管痙攣和早期腦損傷防治找到一條新的途徑。本研究采用血管內穿刺法建立大鼠蛛網膜下腔出血動物模型，探討P53和Bcl-2在在大鼠SAH后早期腦損傷中的表達及意義。
　

3、　 材料和方法
　　 按文獻所述，建立標準大鼠血管內線穿刺法SAH動物模型。健康成年SD大鼠144只(體重300-350mg，雄性)，取24只隨機分為假手術組、SAH組和SP600125(30mg/kg組)，每組8只，為SAH后12小時處理組。另外120只隨機分為6組：對照組(n=20)，假手術組(n=20)，SAH組(n=20)，SAH+DMSO組(n=20)，SAH+10mg/kg(SP600125)(n=20)和SAH+

4、30mg/kg(SP600125)(n=20)。SP600125(JNK抑制劑)溶解于DMSO溶液中，分別于制備蛛網膜下腔出血動物模型前1小時和蛛網膜下腔出血后6小時腹腔注射。同樣劑量的DMSO(不含抑制劑)腹腔注射SAH組作為SAH+DMSO組。免疫組織化學方法檢測鼠腦皮層和海馬區(qū)P53、Bcl-2蛋白的表達。
　　 結果
　　 1、P53在大腦皮質和海馬的陽性表達為細胞核呈棕黃色或棕褐色顆粒粒，伴有少量胞漿表達。正常

5、組同假手術組比較無統計學意義(P>0.05)：SAH組和SAH+DMSO組同對照組比較有顯著統計學差異(P<0.01)；SAH組同SAH+DMSO組比較無統計學意義(P>0.05)。SAH組不同時點(12h和24h)P53的表達有統計學意義(P<0.05)。SP600125(30mg/kg)組P53表達下降(P<0.01)。
　　 2、Bcl-2在大腦皮質和海馬的陽性表達為，胞漿內出現棕黃色或棕褐色顆粒。其在正常腦皮質和海馬均有

6、一定程度的表達。正常對照組和假手術組比較無統計學意義(P>0.05)；SAH組中較對照組和假手術組Bcl-2表達明顯減少(P<0.01)；SAH組、SAH+DMSO組和SP600125(10mg/kg)組比較無統計學意義(P>0.05)；SAH組不同時點(12h和24h)Bcl-2的表達有統計學意義(P<0.05)；SP600125(30mg/kg)組Bcl-2表達升高(P<0.01)。
　　 3、JNK抑制劑SP600125可