白術(shù)茯苓湯不同配比對(duì)脾氣虛克羅恩病大鼠的干預(yù)機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察白術(shù)茯苓湯不同配比對(duì)脾氣虛克羅恩病大鼠細(xì)胞因子的含量、血管活性腸肽及其受體的蛋白表達(dá)以及TLR4、NF-κB基因表達(dá)的影響；探討該方干預(yù)克羅恩病的分子機(jī)制及最佳配比。
　　方法：采用耗氣破氣加饑飽失常之復(fù)因脾虛造模法結(jié)合TNBS/乙醇法建立脾氣虛克羅恩病動(dòng)物模型，運(yùn)用“基線(xiàn)等比增減設(shè)計(jì)法”確立白術(shù)茯苓湯不同配比并予以治療，觀察結(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)變化，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的

2、水平；免疫組化法檢測(cè)結(jié)腸組織VIP及其受體的蛋白表達(dá)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)結(jié)腸組織TLR4mRNA、NF-κBmRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?、俳Y(jié)腸組織病理形態(tài)學(xué)觀察：模型組大鼠結(jié)腸粘膜表面起伏不平，粘膜層灶性壞死脫落，粘膜下層灶性較重，有炎癥反應(yīng)，并見(jiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，巨噬細(xì)胞增生，纖維細(xì)胞增生，有非干酪樣壞死，肌層重度炎癥反應(yīng)可見(jiàn)小膿腫形成。白術(shù)茯苓湯B1、B2、B3、B4、B7、B8、B9、B10組仍可見(jiàn)有粘膜缺損，

3、表面不平，粘膜及粘膜下層可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腸腺結(jié)構(gòu)不完整，杯狀細(xì)胞減少或消失。B5組、B6組上述病理情況減輕，可見(jiàn)腺體及杯狀細(xì)胞，仍見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，明顯少于模型組；
　　②血清TNF-α、IL-1β的含量：模型組大鼠血清TNF-α、IL-1β水平顯著升高（P﹤0.05）；B5組、B6組、B7組血清TNF-α顯著降低（P﹤0.05）；B6組、B7組血清IL-1β水平顯著降低（P﹤0.05）；
　?、垩錓L-4、IL-10

4、含量：模型組大鼠血清IL-4、IL-10水平顯著降低（P﹤0.05）；B6組、B7組血清IL-4水平顯著升高（P﹤0.05）；B6組血清IL-10水平顯著升高（P﹤0.05）；
　　④結(jié)腸組織VIP和VIPR1表達(dá)：模型組大鼠結(jié)腸VIP和VIPR1表達(dá)顯著增高（P<0.05）；白術(shù)茯苓湯B5組、B6、B7組結(jié)腸組織VIP及其受體VIPR1表達(dá)減弱，與模型組比較有明顯差異（P<0.05）；
　?、萁Y(jié)腸組織TLR4mRNA、NF

5、-κBmRNA的表達(dá)：空白組大鼠結(jié)腸組織TLR4mRNA、NF-κBmRNA僅有少量的表達(dá)，模型組大鼠結(jié)腸組織TLR4mRNA、NF-κBmRNA水平顯著升高，與空白組比較有顯著性差異（P<0.05）；白術(shù)茯苓湯B5組、B6組TLR4mRNA、NF-κBmRNA表達(dá)明顯下降，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05）。
　　結(jié)論：白術(shù)茯苓湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾氣虛CD具有干預(yù)作用：能抑制促炎性因子的釋放，降低血清TNF-α、IL-1β含量，同

6、時(shí)促進(jìn)抗炎因子的分泌，提高血清IL-4、IL-10的水平，調(diào)節(jié)促炎性因子和抗炎性因子二者之間的平衡從而減輕腸道的炎癥，對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾氣虛CD發(fā)揮干預(yù)作用。
　　白術(shù)茯苓湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾氣虛CD的干預(yù)作用機(jī)制：能有效抑制TLR4、NF-κB基因的激活，引起下游細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)釋放減少，減輕結(jié)腸的炎癥損傷；同時(shí)降低結(jié)腸組織VIP及其受體VIPR1的表達(dá)，表明有調(diào)節(jié)VIP及其受體的作用，一方面糾正紊亂的胃腸運(yùn)動(dòng)，改善脾氣虛CD的腹瀉、腹脹等癥