湖南省人群FMR-1基因(CGG)-,n-的檢測(cè)及其多態(tài)性分布的研究.pdf

1、目的:脆性X染色體綜合征(Fragile X syndrome,FraX)是常見的遺傳性智力缺陷疾病,它與脆性X智力低下基因-1(Fragile X mental retardation-1,FMR-1)5′端非翻譯區(qū)CGG短串聯(lián)重復(fù)序列(Short tandem repeats,STR)異常擴(kuò)增有關(guān).智力缺陷和發(fā)育遲緩是此綜合征的兩大主要特點(diǎn).由于FraX患病率有逐代增加、致病相關(guān)基因呈動(dòng)態(tài)突變的遺傳規(guī)律,而篩查時(shí)常規(guī)的PCR法又無法

2、檢測(cè)到其基因的動(dòng)態(tài)變化,因此關(guān)于該綜合征的分子致病機(jī)理和有效基因診斷的研究成為醫(yī)學(xué)界重視的問題.目前已有多種篩查及診斷FraX的方法,但不同方法各有其局限性.如細(xì)胞遺傳學(xué)分析雖可以直接觀察染色體脆性位點(diǎn)的病變,但此方法檢出率較低;DNA連鎖分析較細(xì)胞遺傳學(xué)分析增加了可信度,但該技術(shù)需要有先證者,致使檢測(cè)受到一定程度的限制;經(jīng)典的Southern blot法雖然準(zhǔn)確性很高,但需要用同位素來標(biāo)記,給操作者帶來了一定的危害,并且操作繁雜,費(fèi)用

3、昂貴,耗時(shí)長(zhǎng);常規(guī)的PCR法雖簡(jiǎn)便,但因無法打開CG含量高的DNA模板導(dǎo)致擴(kuò)增失敗.因此,探索出一個(gè)穩(wěn)定、快速、適合大規(guī)模人群篩查FraX的方法具有重要的意義.該實(shí)驗(yàn)對(duì)常規(guī)的PCR法進(jìn)行改良后,分別對(duì)湖南省漢族與壯族人群FraX遺傳性標(biāo)記序列的多態(tài)性進(jìn)行研究,旨在了解湖南省人群FMR-1基因中(CGG)n重復(fù)頻態(tài)分布,建立一種大面積快速篩查FraX方法.結(jié)論1.運(yùn)用改良的耐高溫Pfu DNA聚合酶替代的PCR-瓊脂糖凝膠電泳法和堿基替代