敘利亞金黃地鼠高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型快速建立及藥效學(xué)評(píng)價(jià)關(guān)鍵技術(shù)研究.pdf

1、高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化病理改變是冠心病最重要的誘發(fā)因素。制作近人類、質(zhì)量可控、可重復(fù)、規(guī)范化、評(píng)價(jià)指標(biāo)系統(tǒng)化的高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型不僅能為心腦血管疾病基礎(chǔ)與臨床病理生理研究提供合適的病理模型，同時(shí)也能為心腦血管創(chuàng)新藥物臨床前藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供技術(shù)支持。
　　現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)大鼠等嚙齒類高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型在脂質(zhì)損害易感性及脂代謝特點(diǎn)與人類存在較大差異等缺陷，而金黃地鼠與其他動(dòng)物相比在脂代謝方面與人類具有更多的相似之處。

2、本研究采用高脂飼料(HFHC)和超高脂飼料（extra-HFHC）兩種配方進(jìn)行造模，快速誘導(dǎo)出高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型，同時(shí)綜合應(yīng)用血脂測(cè)定和脂蛋白分離、超聲影像分析、全血細(xì)胞分析等技術(shù)，分別對(duì)短、中、長(zhǎng)期（4、21、42周）高脂血癥模型組造模前和造模后第1、2、3、6、9、12、15、18、21、23、26、34和42周血脂水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)連續(xù)監(jiān)測(cè);對(duì)中、長(zhǎng)期(21、42周)動(dòng)脈粥樣硬化模型組造模前和造模后第3、6、9、14、16、20

3、、24和42周血脂水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)連續(xù)監(jiān)測(cè);采用脂蛋白分離、組織病理學(xué)和分子生物學(xué)等方法對(duì)不同時(shí)期實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)動(dòng)物脂蛋白、脂質(zhì)損害靶器官形態(tài)學(xué)和脂代謝相關(guān)蛋白群表達(dá)進(jìn)行觀察，并與大鼠和人類進(jìn)行初步種屬差異性比較。
　　結(jié)果顯示:
　?、俳o予高脂飼料1周后，高脂血癥模型動(dòng)物血清極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)水平顯著上升，至18周時(shí)血脂水平出現(xiàn)下

4、降并進(jìn)入平穩(wěn)期;給予高脂飼料3周后，動(dòng)脈粥樣硬化模型組血脂大幅度迅速上升，3周后血脂水平出現(xiàn)下降并進(jìn)入平穩(wěn)期。
　?、谥鞍讏D譜分析結(jié)果表明，高脂血癥模型短期組血清中極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平顯著增加，高密度脂蛋白(HDL)水平不變;高脂血癥模型中期和長(zhǎng)期組血清VLDL水平仍保持較高水平，HDL水平顯著下降。動(dòng)脈粥樣硬化模型中、長(zhǎng)期組血清VLDL和LDL水平顯著升高，HDL水平不變;動(dòng)脈粥樣硬化模型中期

5、組高密度脂蛋白膽固醇運(yùn)載能力顯著上升，長(zhǎng)期組與正常對(duì)照組相比無顯著變化，提示動(dòng)脈粥樣硬化模型動(dòng)物體內(nèi)血脂紊亂程度呈惡化趨勢(shì)。
　?、鄢曈跋駥W(xué)和病理學(xué)結(jié)果顯示，高脂血癥模型短期組動(dòng)物肝臟出現(xiàn)脂質(zhì)堆積，且隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)脂肪肝病變加重;高脂血癥模型中期組主動(dòng)脈弓部?jī)?nèi)模-中膜最大厚度顯著增加。動(dòng)脈粥樣硬化模型中期動(dòng)物主動(dòng)脈弓部和根部都形成向內(nèi)腔突起的斑塊，長(zhǎng)期組斑塊數(shù)量增多，切面積增大。
　?、芨咧Y模型短期組腫瘤壞死因子-α

6、和白介素-10顯著高于正常對(duì)照組。動(dòng)脈粥樣硬化模型中期組動(dòng)物白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目顯著上升，肝臟中腫瘤壞死因子-α顯著高于正常對(duì)照組，而白介素-1β顯著低于正常對(duì)照組。長(zhǎng)期組腫瘤壞死因子-α、白介素-1β、白介素-6和白介素-10顯著低于正常對(duì)照組。
　?、莸鞍妆磉_(dá)分析結(jié)果表明，高脂血癥模型和動(dòng)脈粥樣硬化模型動(dòng)物肝臟固醇反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2(SREBP2)表達(dá)始終呈現(xiàn)下調(diào)趨勢(shì)。高脂血癥模型短、中、長(zhǎng)期組與正常組對(duì)比

7、肝臟羥甲戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)表達(dá)無顯著變化，短期組肝臟B型清道夫受體Ⅰ(SR-BI)表達(dá)上調(diào)，中期和長(zhǎng)期組肝臟低密度脂蛋白受體(LDL-R)、固醇O-酰基轉(zhuǎn)移酶(SOAT1)和SR-BI表達(dá)顯著下降，長(zhǎng)期組動(dòng)物肝臟ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子1(ABCA1)表達(dá)顯著上升，卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)表達(dá)顯著下降。動(dòng)脈粥樣硬化模型中期組動(dòng)物肝臟HMGCR表達(dá)無顯著變化，LDL-R和膽固醇7α羥化酶(CYP7A1)表達(dá)顯著下降，AB

8、CA1表達(dá)顯著上升，長(zhǎng)期組動(dòng)物肝臟中SREBP2、HMGCR、LDL-R、SR-BI、SOAT1、LCAT、CYP7A1的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組，ABCA1表達(dá)水平顯著高于正常對(duì)照組。
　?、蕹醪椒N屬差異性比較表明:與大鼠相比，金黃地鼠脂蛋白譜與人類更為相近，對(duì)膳食中膽固醇和甘油三酯敏感性更高。
　　采用高脂喂飼法可快速建立金黃地鼠高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型，應(yīng)用各種檢測(cè)技術(shù)方法，對(duì)金黃地鼠血脂、脂蛋白、脂毒性靶器官和脂代謝