微透析方法檢測萬古霉素在玻璃體內(nèi)代謝的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文微透析方法檢測萬古霉素在玻璃體內(nèi)代謝的實(shí)驗(yàn)研究姓名：王亞玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：陳曉隆20040301膜緣后2 - 3 m m 處打一孔，將探頭插入玻璃體腔內(nèi)，探針的入口管和出口管固定于鞏膜壁、眶骨及皮膚上。4 ．回收率的測定：配制2 0 u g ／m l 標(biāo)準(zhǔn)萬古霉素溶液，持續(xù)灌注探針，每2 0 m i n 采樣一次，3 次，檢測色譜峰，利用峰面積，計(jì)算回收率。5 。微透析采樣( 清醒兔模型的

2、制備) ：探針植入后2 4 h ，兔清醒狀態(tài)下，將1 m g ／0 ．1 m l 的萬古霉素溶液注射于正常兔眼和眼內(nèi)炎兔眼玻璃體內(nèi)，立即用R i n g e r ’s 液持續(xù)灌注，每2 0 r a i n 采樣一次，持續(xù)6 h ，然后分別在1 2 h 、2 4 h 、4 8 h 、7 2 h 和8 4 h 采樣4 0 u l ，H P L C —u V 檢測萬古霉素的濃度。二、對(duì)照組( 直接采樣組)將l m g ／0 ．1 m l 的萬

3、古霉素溶液注射于正常兔眼玻璃體內(nèi)，分別在1 、1 2 、2 4 、4 8 、7 2 和8 4 h 處死兔4 只，摘除眼球，抽取全部玻璃體，經(jīng)過濾提純后，H P L C - U V 檢測。三、藥物分析方法：高效液相色譜法( H P L C —U V )色譜條件：色譜柱：K r o m a s i lC 1 8 ( 2 5 0 ×4 ．6 m m ) ；流動(dòng)相：乙腈：0 ．0 5 MK H 2 P 0 4 ( 1 0 ：9 0 )

4、 ，p H = 4 ．0 ；流速：1 ．0 m l ／m i n ；H P L C —u V 檢測波長：2 1 0 n m ；進(jìn)樣量：2 0 u l ；靈敏度：0 ．0 1 u g ／m l ；柱溫：室溫2 3 0 C ；檢測限度：0 ．0 5 u g ／m l 。按倍比稀釋精確配制一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)萬古霉素溶液，H P L C ．u V 檢測，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和方程；然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程和探針的回收率，計(jì)算玻璃體內(nèi)萬古霉素的實(shí)際濃度。利用t -

5、 t e s t 檢驗(yàn)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。四、數(shù)據(jù)處理：本文數(shù)據(jù)采用3 p 9 7 藥代動(dòng)力學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、萬古霉素的標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)線和方程，方程為Y = 3 5 3 5 3 1 x ．1 2 7 3 6 9 ，R =0 ．9 9 9 9 。二、在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，所有兔眼對(duì)探針的相容性良好，沒有感染、自內(nèi)障和視網(wǎng)膜脫離等并發(fā)癥的發(fā)生。探針的回收率為8 - 1 2 ％。三、實(shí)驗(yàn)組正常兔眼玻璃體內(nèi)萬古霉素的最大濃度為7 1 5 ．2

6、 9 u g ／m l ，半衰期為5 1 ．6 6 h ，清除速率常數(shù)為0 ．0 2 6 u g ／h ；炎癥兔眼玻璃體內(nèi)萬古霉素的最大濃度為6 0 9 ．2 2 u g ／m l ，半衰期為1 1 ．9 1 h ，清除速率常數(shù)為0 ．0 9 5 u g ／h 。所有的動(dòng)物在注藥后3 0 - 6 0 r a i n ，萬古霉素在玻璃體內(nèi)達(dá)到最大濃度，炎癥眼玻璃體內(nèi)萬古霉素的代謝明顯快于正常眼。兩組數(shù)值t ．檢驗(yàn)，有顯著統(tǒng)·2