靜脈用魚腥草注射劑致敏性評價和比較藥理學研究.pdf

1、魚腥草注射劑作為中藥注射劑臨床嚴重不良反應發(fā)生的代表藥，其再研究和再評價工作具有非常重要的現(xiàn)實意義。對魚腥草注射劑開展安全性再評價工作，必須從制劑工藝、質(zhì)量標準、藥理毒理、臨床使用及藥物經(jīng)濟學等方面進行全面的科學評估。本課題組對魚腥草注射劑臨床不良反應的因為進行系統(tǒng)分析研究，明確魚腥草注射劑中的主要致敏物質(zhì)，完善生產(chǎn)質(zhì)量標準，改進魚腥草注射劑制備工藝，從而提高了注射劑的安全性、有效性和穩(wěn)定性，為其恢復生產(chǎn)和臨床應用提供科學依據(jù)。本論文主

2、要包括以下四個內(nèi)容：
　　 1文獻綜述
　　 本論文文獻綜述部分系統(tǒng)論述了三個方面的內(nèi)容：①魚腥草及其制劑研究進展；②魚腥草注射劑臨床不良反應因為分析和對策；③注射用輔料吐溫80和羥丙基—β—環(huán)糊精研究進展。以上這些論述為論文的整體研究奠定了理論基礎。
　　 2魚腥草注射液原、新制劑及其輔料的致敏性評價實驗研究
　　 本研究分別采用小鼠、Beagle犬和食蟹猴對魚腥草注射液原、新制劑及其輔料進行致敏性評價

3、研究。類過敏實驗以單次靜脈恒速注射給藥，觀察給藥后動物的行為變化和血中組胺含量。過敏實驗為三次隔日靜脈注射給藥，此為致敏階段，在首次給藥后14天藥量加倍激發(fā)給藥。同樣觀察動物的行為學變化和血漿中組胺、IgE的含量，綜合判定結(jié)果。結(jié)果表明類過敏反應以Beagle犬為最佳實驗動物，以行為異常及組胺升高為主要判定指標，IgE作為輔助指標，結(jié)果準確可靠。食蟹猴在同樣條件下不如上述動物敏感。小鼠行為表現(xiàn)更不典型，血液指標的檢測誤差較大，實驗結(jié)果僅

4、供參考。實驗表明吐溫80是誘發(fā)類過敏反應的代表性物質(zhì)。羥丙基—β—環(huán)糊精類過敏和過敏反應結(jié)果均為陰性。以羥丙基—β—環(huán)糊精為增溶劑的魚腥草注射液新制劑致敏性評價結(jié)果為陰性。
　　 3魚腥草注射液新、原制劑比較藥理學實驗研究
　　 抗病毒實驗采用流感病毒FM1和PR8病毒株體內(nèi)感染小鼠肺炎模型，體外CPE法和神經(jīng)氨酸酶熒光測定法、病毒載量檢測和小鼠死亡保護實驗方法，結(jié)果顯示魚腥草注射液新制劑對流感病毒感染引起的小鼠肺部炎癥

5、均有明顯治療和預防作用，可改善小鼠肺炎癥狀，降低肺指數(shù)，病毒載量，降低死亡率，延長小鼠存活時間；但其抗病毒作用并不是通過直接抑制或殺死病毒，對神經(jīng)氨酸酶活力也不具有抑制作用。新制劑對二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹有明顯抑制作用，能降低醋酸導致的小鼠腹腔毛細血管通透性；同時，還能降低干酵母致大鼠體溫升高，對脂多糖導致的家兔體溫升高有明顯的抑制作用。魚腥草注射液抗炎、解熱作用可能是通過抑制炎癥因子TNF—α、IL—1β、IL—8和PGE2釋放而發(fā)揮作

6、用。魚腥草注射液新、原制劑抗病毒、抗炎解熱作用相當。
　　 4魚腥草注射劑中吐溫80的定性定量測定方法建立
　　 本研究采用硫氰酸鈷銨顯色法、薄層層析法和碘化鉍鉀法三種方法進行吐溫80的定性鑒定，實驗結(jié)果一致。吐溫80的定量檢測方法能準確的檢測中藥注射劑中吐溫80含量。吐溫80的定性定量方法的建立在實驗室條件下可以隨機抽取不同廠家、不同批次樣品進行吐溫80定性定量測定。
　　 本研究主要結(jié)論如下：
　　

7、1中藥注射劑誘發(fā)過敏和類過敏反應的異同比較：中藥注射劑導致臨床嚴重不良反應70％以上為類過敏反應，與IgE介導的經(jīng)典抗原抗體反應不同。主要特征為：首次注射藥物即可出現(xiàn)嚴重不良反應及過敏性休克，與過敏反應癥候群相似。屬于非抗原抗體反應，IgE、IgG未見明顯規(guī)律性變化，但體內(nèi)組胺明顯升高。其致敏物質(zhì)為抗原或半抗原物質(zhì)及某些可以為誘發(fā)組胺釋放的多種物質(zhì)。存在明顯的量效關系，大劑量、高濃度可誘發(fā)嚴重不良反應。多種注射劑聯(lián)合應用可提高發(fā)生率及嚴

8、重性。類過敏反應以Beagle犬為最佳實驗動物，以行為異常及組胺升高為主要判定指標，IgE作為輔助指標，結(jié)果準確可靠。因此，推薦采用Beagle犬致敏性評價方法作為中藥注射劑出廠前的常規(guī)安全性檢測方法。
　　 2魚腥草注射劑中主要致敏物質(zhì)為增溶劑吐溫80，魚腥草雙蒸餾液無明顯的毒副作用。中藥注射劑引發(fā)不良反應的致敏原除了考慮藥物本身因素，還有制劑外加輔料和制備、儲存過程中內(nèi)、外源性污染物，這為尋找和解決中藥注射劑不良反應誘發(fā)因素

9、提供了思路和方法。
　　 3吐溫80國內(nèi)外應用廣泛。中藥注射劑134品種中吐溫80添加情況很不確定。如果這些品種全部換掉將事關幾十個注射劑產(chǎn)品，數(shù)百家生產(chǎn)企業(yè)及幾十萬產(chǎn)業(yè)工人的生存，對社會穩(wěn)定和經(jīng)濟影響是必須慎重考慮的問題。通過我們研究發(fā)現(xiàn)吐溫80引起的類過敏反應存在著明顯的量效關系。因此，優(yōu)選最佳質(zhì)量、最適用量和濃度的吐溫80，既能保證助溶效果，又能最大限度的提高制劑安全性和制劑穩(wěn)定性。
　　 4羥丙基—β—環(huán)糊精助溶

10、效果好、穩(wěn)定，無明顯毒性、致敏性及溶血性，是目前比較理想的增溶劑。以羥丙基—β—環(huán)糊精替換掉吐溫80的魚腥草注射液新制劑，其溶解性、安全性和藥效不受影響，為其恢復生產(chǎn)和臨床應用提供了科研依據(jù)。
　　 5誘發(fā)魚腥草注射劑臨床嚴重不良反應因素除了藥物自身因素，制劑工藝中加入吐溫80以及臨床不合理用藥外，還存在很多偶發(fā)因素。因此，本研究只解決了中藥注射劑安全性事件中的一個因素，而不是唯一因素，還需要深入開展多方面研究，為中藥注射劑進行

11、全面再評價和再研究提供思路和方法。
　　 本研究的創(chuàng)新點如下：
　　 1比較中藥注射劑導致類過敏和過敏反應的異同，主要從臨床反應、病機、誘發(fā)物質(zhì)、給藥次數(shù)、劑量、檢測指標、非臨床評價方法和配伍禁忌進行了概括和總結(jié)；
　　 2采用不同種屬動物進行類過敏實驗研究，優(yōu)選實驗動物、檢測指標，優(yōu)化致敏性評價方法，建立中藥注射劑類過敏反應的評價方法和指標；
　　 3通過一系列藥學、安全性和比較藥理學研究，證實以羥丙基