三種脂肪乳劑對LPS所致大鼠肺部急性炎癥的影響.pdf

1、目的： 1、探討LPS所致的SD大鼠肺部急性炎癥損傷的機(jī)制。 2、探討20％Intralipid、20％Clinoleic和10％Omegaven三種脂肪乳劑對LPS所致的大鼠肺部急性炎癥損傷中炎癥介質(zhì)及炎癥因子表達(dá)的干預(yù)作用。 3、探討三種脂肪乳劑對LPS所致的大鼠肺部急性炎癥損傷中肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響。 方法： 1、模型和分組幼年Sprague-Dawley大鼠60只隨機(jī)分為五組，每組12只

2、，分別為空白組、LPS組、Intra組、Clino組和Omega組。處理方法：五組分別通過尾靜脈連續(xù)7天注射5％GS、5％GS、20％Intralipid、20％Clinoleic和10％Omegaven，劑量為30ml/Kg。第7天取標(biāo)本，在取標(biāo)本前8小時(shí)，經(jīng)腹腔注射10％水合氯醛3.5～4.0ml/kg麻醉大鼠后，固定大鼠，暴露氣管?？瞻捉M氣管內(nèi)滴入生理鹽水0.25ml/kg，其余四組分別滴入等量LPS(劑量為0.5mg/Kg，濃度

3、為2mg/ml)。 2、指標(biāo)檢測每天記錄SD大鼠的成活率、體重及狀態(tài)。分別在第7d時(shí)，經(jīng)腹腔麻醉大鼠，留取血標(biāo)本，采用ELISA法檢測血清中PGE2和LTB4蛋白含量。留取肺組織記錄肺濕重。其中左肺于Eppendorf管-80℃冰箱內(nèi)保存，用以制成肺組織勻漿，采用RT-PCR法測定IL-1β mRNA表達(dá)水平。右肺：標(biāo)本離體后，4％甲醛液保存，石蠟包埋、切片，常規(guī)蘇木素伊紅(HE)染色，分別在光鏡下觀察各組大鼠肺組織的病理改變，

4、并用脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)原位檢測肺細(xì)胞凋亡并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果： 1、光鏡下結(jié)果：空白組無明顯的炎癥表現(xiàn)；LPS組、Intra組、Clino組和Omega組大鼠肺組織病理改變明顯，可見明顯炎癥細(xì)胞浸潤、出血。 2、肺系數(shù)結(jié)果：與LPS組、Intra組、Clino組和Omega組四組相比，空白組肺系數(shù)最低(0.368±0.04)；雖然LPS組、Intra組、Clino組和

5、Omega組四組肺系數(shù)較空白組有提高，但對它們進(jìn)行兩兩比較，差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3、細(xì)胞凋亡結(jié)果：空白組凋亡指數(shù)(AI)為3.267±2.011，LPS組為25.330±3.137，Intra組為32.613±2.189，Clino組為16.987±2.076，Omega組為19.647±1.946)。各組凋亡指數(shù)相比較，空白組凋亡指數(shù)(AI)最低(P<0.05)；Intra組AI最高(P<0.05)：LPS組

6、AI高于Clino組AI低于Omega組(P<0.05)；Clino組AI低于Omega組(P<0.05)。 4、ELISA檢測結(jié)果：空白組，LPS組，Intra組，Clino組Omega組的LTB4蛋白表達(dá)水平分別為59.316±10.018，295.485±68.354，433.961±65.080，140.783±29.738和162.092±26.994。其中空白組LTB4水平最低(P<0.05)，Intra組最高(P<

7、0.05)。LPS組LTB4水平均高于Clino組和Omega組和(P<0.05)，Omega組LTB4水平高于Clino組(P<0.05)。五組PGE2表達(dá)水平分別為5.670±3.943、30.614±16.489，46.791±17.986，43.410±21.545和24.613±11.446。空白組PGE2水平最低(P<0.05)，LPS組、Intra組、Clino組和Omega組四組與空白組相比，PGE2水平相對較高，尤以I

8、ntra組最高，但對該四組進(jìn)行兩兩比較時(shí)，差異無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5、RT-PCR檢測結(jié)果：五組中空白組(0.111±0.032)IL-1β mRNA表達(dá)水平最低(P<0.05)，Intra組(0.592±0.060)最高(P<0.05)；LPS組(0.435±0.070)IL-1β mRNA表達(dá)水平均高于Clino組和Omega組(P<0.05)；Clino組(0.214±0.046)與Omega組(0.256

9、±0.060)相比，Clino組IL-1β mRNA表達(dá)水平略低，但差異無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1、LPS可成功復(fù)制SD大鼠肺部急性炎癥損傷。 2、20％Intralipid加重SD大鼠的肺部急性炎癥反應(yīng)，與其增加炎癥介質(zhì)PGE2、LTB4及炎癥因子IL-1β的產(chǎn)生有關(guān)。 3、與20％Intralipid相比，20％Clinoleic和10％Omegaven均可減輕LPS所致的肺部炎癥