三種天然植物化學(xué)物的抗誘變性研究.pdf

1、葉綠素、番茄紅素、染料木素是膳食成分中較常見(jiàn)的幾種天然植物化學(xué)物。由于其具有多種生物學(xué)活性，現(xiàn)已大量用于藥品、保健食品開(kāi)發(fā)。有研究提示這幾種物質(zhì)可能具有一定的抗誘變活性。本研究的目的是用人的類(lèi)淋巴母細(xì)胞TK6的TK基因突變?cè)囼?yàn)和彗星試驗(yàn)評(píng)價(jià)這幾種植物化學(xué)物的抗誘變性，一方面為其進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用提供毒理學(xué)依據(jù)，并為T(mén)K基因突變?cè)囼?yàn)在藥品、保健食品原料安全性評(píng)價(jià)中的推廣應(yīng)用積累資料；另一方面探討TK基因突變?cè)囼?yàn)用于抗誘變性評(píng)價(jià)的可能，以拓展

2、TK基因突變?cè)囼?yàn)的應(yīng)用范圍。 在TK基因突變?cè)囼?yàn)中，不加S9的情況下，分別以lO、20、40、80iμg／ml的葉綠素，5、10、20、40μg／ml的番茄紅素和0.625、1.25、2.5、5μg／ml的染料木素與陽(yáng)性致突變物絲裂霉素C(MMC)同時(shí)處理TK6細(xì)胞3h，采用微孔板法進(jìn)行細(xì)胞毒性、平板接種效率和突變頻率測(cè)定。結(jié)果顯示，隨受試物劑量的增加，葉綠素和番茄紅素對(duì)誘變性的拮抗作用增大，當(dāng)葉綠素劑量達(dá)到40μg/ml以上、

3、番茄紅素劑量達(dá)到20μg/ml以上時(shí)，TK位點(diǎn)的總突變頻率與MMC對(duì)照組比較有顯著性降低(P<0.05)，而染料木素僅在0.625μg／ml的劑量時(shí)可明顯降低MMC誘導(dǎo)的。TK6細(xì)胞tl位點(diǎn)突變頻率。 在彗星試驗(yàn)中，分別以10、20、40、80μg/ml葉綠素，5、10、20、40μg／ml番茄紅素和0.625、1.25、2.5、5μg／ml染料木素與陽(yáng)性致突變物重鉻酸鉀(K<,2>Cr<,2>0<,7>)同時(shí)處理TK6細(xì)胞1h

4、，在葉綠素達(dá)到80μg/ml和番茄紅素達(dá)到20μg/ml時(shí)，TK6細(xì)胞的拖尾率和拖尾細(xì)胞尾長(zhǎng)與抗誘變陽(yáng)性對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，而與K<,2>Cr<,2>0<,7>對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)，表明在此劑量下葉綠素和番茄紅素能抑制K<,2>Cr<,2>0<,7>誘導(dǎo)的。tK6細(xì)胞DNA單鏈斷裂，有明顯的抗誘變作用。在染料木素各劑量組均未見(jiàn)TK6細(xì)胞的拖尾率和拖尾細(xì)胞尾長(zhǎng)與K<,2>Cr<,2>0<,7>組相比有

5、顯著性差異，表明染料木素在本試驗(yàn)條件下無(wú)明顯的抑制K<,2>Cr<,2>O<,7>誘導(dǎo)TK6細(xì)胞DNA單鏈斷裂的作用。 本研究表明，在同時(shí)處理方式下，較大劑量的葉綠素、番茄紅素有明顯的抗MMC誘導(dǎo)的tk基因突變的作用，即可明顯降低MMC誘導(dǎo)的TK6細(xì)胞tk位點(diǎn)突變頻率。低劑量的染料木素能否拮抗MMC對(duì)TK6細(xì)胞的致突變作用，還有待進(jìn)一步研究。TK基因突變?cè)囼?yàn)對(duì)這三種植物化學(xué)物抗誘變性的成功檢測(cè)，提示該試驗(yàn)在抗誘變研究領(lǐng)域有較好的