微生物發(fā)酵法水解乳清粉制備生物活性肽的研究.pdf

1、利用微生物發(fā)酵法制備生物活性肽已成為近年來(lái)研究的新熱點(diǎn)，對(duì)于功能性食品的開(kāi)發(fā)具有十分重要的意義。本文從乳酸克魯維酵母(Kluyveromyceslactis)TS2001，TS2002，TS2003，嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)TS2004和瑞士乳桿菌(Lactobacillushelveticus)TS2005，TS2006六株菌中篩選出了一株水解乳清蛋白能力較強(qiáng)的菌株，瑞士乳桿菌TS2005，并且對(duì)

2、其進(jìn)行了基本性狀的確定。同時(shí)，還對(duì)其單因素發(fā)酵條件作了系統(tǒng)的研究，測(cè)定了生長(zhǎng)曲線，蛋白酶合成曲線及產(chǎn)酸曲線，并且測(cè)定了蛋白酶活力。然后，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了ACE抑制活性的檢測(cè)，通過(guò)對(duì)其發(fā)酵條件的優(yōu)化，確定了瑞士乳桿菌TS2005生產(chǎn)ACE抑制肽的最佳發(fā)酵條件，并且研究了發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液ACE抑制活性的變化，確定了產(chǎn)品最佳收獲時(shí)間。而后，對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了超濾，確定了ACE抑制肽的基本分子量分布。最后，采用兩種干燥方式對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品進(jìn)行干燥，確定了A

3、CE抑制肽的生產(chǎn)方法。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：瑞士乳桿菌TS2005為耐氧菌，菌體形態(tài)呈短桿狀，單個(gè)存在或相連呈鏈狀排列，最適生長(zhǎng)溫度為30℃-42℃，最適生長(zhǎng)pH值為4.50-7.50。對(duì)于瑞士乳桿菌水解乳清粉單因素發(fā)酵條件的研究，確定了乳清粉濃度為10％，發(fā)酵方式采用靜止培養(yǎng)的方式，菌體蛋白酶最適水解溫度為35℃，發(fā)酵初始pH值為5.50。在此條件下發(fā)酵24h內(nèi)生物量、蛋白酶活力以及產(chǎn)酸均達(dá)到最佳水平。蛋白酶活力經(jīng)測(cè)定為5U，并證實(shí)

4、為細(xì)胞壁絲氨酸蛋白酶。對(duì)于瑞士乳桿菌TS2005發(fā)酵液進(jìn)行ACE(AngiotensinI-ConvertingEnzyme血管緊張素轉(zhuǎn)移酶)抑制活性的檢測(cè)，確定了ACE抑制率為24.16％；對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，確定了生產(chǎn)ACE抑制肽的最佳發(fā)酵條件為33℃，發(fā)酵液的初始pH為5.5，接種量為1.5％，在此條件下培養(yǎng)瑞士乳桿菌，發(fā)酵16小時(shí)收獲，發(fā)酵液中游離氨基酸含量為3.004μg/mL，活菌數(shù)達(dá)到108cfu/mL，發(fā)酵液ACE抑制