白花丹參水提物對(duì)小鼠局灶性腦梗死炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、目的： 觀察小鼠局灶性腦梗死皮層IL-1β、TNF-α、ICAM-1的表達(dá)及MPO活性的時(shí)程變化，探討預(yù)防性應(yīng)用白花丹參水提物對(duì)局灶性腦梗死的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法： 小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、假手術(shù)組、腦梗死組、白花丹參低劑量組（10g／kg）、白花丹參中劑量組（20g／kg）、白花丹參高劑量組（40g／kg）。采用水煎法制作白花丹參水提物，白花丹參組按相應(yīng)劑量連續(xù)灌胃7d，然后制作腦梗死模型。采用光化學(xué)法制作

2、小鼠局灶性腦梗死模型。免疫組化法檢測(cè)腦組織切片IL-1β、TNF-α、ICAM-1蛋白的表達(dá)，ELISA法檢測(cè)梗死側(cè)皮層勻漿IL-1β、TNF-α、 ICAM-1蛋白的表達(dá)變化，比色法檢測(cè)梗死側(cè)皮層勻漿MPO活性的變化，TTC染色法測(cè)定梗死體積。 結(jié)果： 1、免疫組化顯示腦梗死組梗死區(qū)及其周圍可見IL-1β表達(dá)，陽性細(xì)胞主要為神經(jīng)元和血管內(nèi)皮細(xì)胞。ELISA結(jié)果顯示腦梗死組梗死側(cè)皮層IL-1β含量于梗死后1h開始升高，6

3、h達(dá)高峰，12h開始下降，48～72h恢復(fù)至正常水平。梗死區(qū)及其周圍可見TNF-α表達(dá)，陽性細(xì)胞多為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞，少量為血管內(nèi)皮細(xì)胞。梗死側(cè)皮層TNF-α含量于梗死后3h開始升高，6h達(dá)高峰，12h開始下降，72h恢復(fù)至正常水平。梗死區(qū)及其周圍可見ICAM-1表達(dá)，陽性細(xì)胞主要為血管內(nèi)皮細(xì)胞，少量為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞。梗死側(cè)皮層ICAM-1含量于梗死后3h開始升高，12h達(dá)高峰，24h開始下降，72h恢復(fù)至正常水平。梗死側(cè)皮層MPO活

4、性于梗死后3h開始升高，12h達(dá)高峰，24h開始下降，72h恢復(fù)至正常水平。梗死側(cè)皮層ICAM-1表達(dá)含量與IL1β表達(dá)含量呈正相關(guān)（r=0．838，p<0.01），與TNF-α表達(dá)含量呈正相關(guān)（r=0.962，p<0.01）；梗死側(cè)皮層MPO活性與ICAM-1表達(dá)含量呈正相關(guān)（r=0.980，p<0.01）。 2、與局灶性腦梗死組比較，白花丹參三個(gè)劑量組梗死體積均明顯縮小，低劑量組（p＜0.05），中、高劑量組（p＜0.01）

5、。三個(gè)劑量組之間比較依次縮小，中劑量組與低劑量組比較（p＜0.01），高劑量組與中劑量組比較（p＜0.05）。與腦梗死組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，白花丹參三個(gè)劑量組3個(gè)時(shí)間點(diǎn)梗死側(cè)皮層IL-1β含量均明顯降低（p＜0.01）；在各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，白花丹參三個(gè)劑量組之間比較，梗死側(cè)皮層IL-1β的含量無差異（p＞0.05）。與腦梗死組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，白花丹參低劑量組3個(gè)時(shí)間點(diǎn)梗死側(cè)皮層INF-α含量均無差異；白花丹參中劑量組3h時(shí)間點(diǎn)降低（p＜0.05

6、），6h時(shí)間點(diǎn)降低（p＜0.01），12h時(shí)間點(diǎn)無差異（p＞0.05）；白花丹參高劑量組3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均明顯降低（p＜0.01）。與腦梗死組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較，白花丹參低、中、高劑量組梗死側(cè)皮層ICAM-1的含量依次降低（p＜0.01）；在3h時(shí)間點(diǎn)，白花丹參中、低劑量組之間比較（p＜0.05），白花丹參高、中劑量組之間比較（p＞0.05）；在6h和12h時(shí)間點(diǎn)，白花丹參中、低劑量組之間比較（p＜0.01），白花丹參高、中劑量組之間比較（p＜0

7、.01）。與腦梗死組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)梗死側(cè)皮層MPO的活性比較，白花丹參低、中、高劑量組依次降低（p＜0.01）；在3h時(shí)間點(diǎn)，白花丹參中、低劑量組之間比較（p＜0.05），白花丹參高、中劑量組之間比較（p＞0.05）；在6h時(shí)間點(diǎn)，白花丹參中、低劑量組之間比較（p＜0.01），白花丹參高、中劑量組之間比較（p＞0.05）；在12h時(shí)間點(diǎn)，白花丹參中、低劑量組之間比較（p＜0.01），白花丹參高、中劑量組之間比較（p＜0.05）。 結(jié)

8、論： 1、光化學(xué)法誘導(dǎo)小鼠局灶性腦梗死早期炎癥反應(yīng)參與了缺血腦組織的損傷過程，腦梗死后梗死側(cè)皮層IL-1β、TNF-α和ICAM-1的表達(dá)升高，中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)增加，并呈一定的時(shí)程變化規(guī)律。 2、預(yù)防性應(yīng)用白花丹參水提物對(duì)小鼠局灶性腦梗死有明顯保護(hù)作用，并有劑量依賴性趨勢(shì)，其機(jī)制之一可能與白花丹參水提物抑制缺血腦細(xì)胞IL-1β、INF-α的釋放，減少梗死區(qū)血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1的表達(dá)，減輕梗死區(qū)中性粒細(xì)胞的粘附浸潤(rùn)，從