西洛他唑影響大鼠腎下型腹主動脈瘤發(fā)生和進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：
　　 腹主動脈瘤是一種常見的危害人類健康的大血管疾病，好發(fā)于65歲以上的男性人群。因腹主動脈瘤導(dǎo)致的死亡約占發(fā)達(dá)國家總死亡人數(shù)的2％，居人群死亡原因的第10位。腹主動脈瘤的治療目前仍以手術(shù)為主。開腹修復(fù)術(shù)和腔內(nèi)修復(fù)術(shù)雖成功挽救了大量生命，但仍存在開腹手術(shù)死亡率高達(dá)2.7-5.5％，腔內(nèi)介入術(shù)費(fèi)用昂貴且5年返修率高達(dá)20％等諸多不足。尤其對于直徑<5.5cm的小腹主動脈瘤，是否進(jìn)行早期手術(shù)干預(yù)尚存在爭論，目前沒有較好的

2、治療方法。因此，尋找無創(chuàng)的且能有效預(yù)防或延緩腹主動脈瘤病情的方法刻不容緩。
　　 選擇性磷酸二酯酶3抑制劑西洛他唑因具有顯著的抗血小板和擴(kuò)血管作用被廣泛用于動脈硬化閉塞性疾病和預(yù)防心梗腦梗等。近年來研究發(fā)現(xiàn)西洛他唑還具備抗血管炎癥、抑制蛋白水解酶異常表達(dá)和活化、減少氧化應(yīng)激、保護(hù)血管內(nèi)皮等多種血管保護(hù)作用。而血管炎癥、基質(zhì)破壞、氧化應(yīng)激等恰是腹主動脈瘤發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制。本項(xiàng)目以大鼠腹主動脈瘤模型為研究對象，檢驗(yàn)西洛他唑?qū)Υ笫蟾?/p>

3、主動脈瘤發(fā)生和進(jìn)展的作用并初步探討其影響機(jī)制，為人腹主動脈瘤的藥物治療開辟新的思路。全文分為三部分：
　　 第一章大鼠腎下型腹主動脈瘤模型構(gòu)建的研究
　　 目的：采用改進(jìn)的方法建立成功率高、血流動力學(xué)和病理學(xué)特征符合人腹主動脈瘤的大鼠腎下型腹主動脈瘤模型。
　　 方法：將30只SD大鼠隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組(10只)、生理鹽水灌注組(10只)、彈力蛋白灌注組(10只)，分別進(jìn)行腹主動脈不灌注、生理鹽水灌注、彈力蛋

4、白酶灌注。術(shù)中在插管位置選擇、灌注前檢測密封性、灌注后沖洗灌注部位及修補(bǔ)插管口等方面對傳統(tǒng)的建模方法進(jìn)行了改進(jìn)。于術(shù)前、術(shù)后7天、術(shù)后14天通過彩色超聲診斷儀測量腹主動脈尺寸以檢驗(yàn)腹主動脈腔內(nèi)彈力蛋白灌注法能否建成腹主動脈瘤疾病模型。術(shù)后14天收集腹主動脈組織和血清標(biāo)本，對與基質(zhì)破壞、血管炎癥等相關(guān)的彈力纖維、MMP-9蛋白表達(dá)、組織和血循環(huán)IL-6水平等進(jìn)行檢測。
　　 結(jié)果：術(shù)后14天彈力蛋白灌注組大鼠死亡率僅10％，其腹主

5、動脈橫截面積大于假手術(shù)組和生理鹽水灌注組(P<0.001)，約為其自身術(shù)前橫截面積的5倍。彈力蛋白灌注組彈力纖維出現(xiàn)明顯破壞，含量大量減少，動脈組織有明顯的炎癥細(xì)胞浸潤，MMP-9蛋白表達(dá)、組織和血循環(huán)IL-6水平均明顯升高，與其他兩組相比有顯著差異(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)通過選擇左側(cè)髂總動脈插灌注管、灌注前檢測密封性、灌注后沖洗灌注部位及修補(bǔ)髂總動脈破口等一系列方法上的改進(jìn)可以降低彈力蛋白酶加壓灌

6、注建模中大鼠的死亡率并使大鼠模型在血流動力學(xué)上更好地模擬人腹主動脈瘤。
　　 (2)彈力蛋白酶灌注建立的大鼠腎下型腹主動脈瘤模型可以模擬人腹主動脈瘤基質(zhì)破壞和透璧性炎癥的特點(diǎn)。
　　 第二章西洛他唑影響大鼠腎下型腹主動脈瘤發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：檢驗(yàn)西洛他唑?qū)Υ笫竽I下型腹主動脈瘤發(fā)生的作用并初步探討其影響機(jī)制。
　　 方法：將48只SD大鼠隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組(16只，腹主動脈不灌注彈力蛋白酶)、生

7、理鹽水治療組(16只，灌注彈力蛋白酶)、西洛他唑治療組(16只，灌注彈力蛋白酶)，于術(shù)前1天開始每天分別給予生理鹽水灌胃、生理鹽水灌胃、西洛他唑(100mgkg-1d-1)灌胃，并在術(shù)前、術(shù)后7天、術(shù)后14天通過彩色超聲診斷儀測量腹主動脈尺寸以檢驗(yàn)西洛他唑?qū)Υ笫竽I下型腹主動脈瘤發(fā)生的影響。術(shù)后14天收集腹主動脈組織和血清標(biāo)本，檢測與基質(zhì)破壞、血管炎癥、氧化應(yīng)激等相關(guān)的動脈瘤組織彈力纖維、MMP-2，9的mRNA、蛋白表達(dá)及活性、NF-κ

8、B的活性、NADPH氧化酶活性和其產(chǎn)物ROS的水平、血循環(huán)IL-6水平。
　　 結(jié)果：術(shù)后14天西洛他唑治療組大鼠腹主動脈橫截面積相對于假手術(shù)組有擴(kuò)大(P<0.001)，但其擴(kuò)大幅度受到抑制，明顯低于生理鹽水治療組(P<0.001)，約為生理鹽水治療組的2/3。西洛他唑治療組彈力纖維破壞不如生理鹽水治療組明顯，且MMP-2，9的mRNA、蛋白表達(dá)及活性、NF-κB的活性、NADPH氧化酶活性和其產(chǎn)物ROS的水平、血循環(huán)IL-6水

9、平等升高的幅度均較生理鹽水治療組低(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)西洛他唑可以抑制彈力蛋白酶灌注法誘導(dǎo)的大鼠腎下型腹主動脈瘤的發(fā)生。
　　 (2)彈力蛋白酶灌注法建立的大鼠腹主動脈瘤組織中NF-κB的活性、NADPH氧化酶的活性、MMP-2，9的表達(dá)及活性、ROS水平均是上調(diào)的，可模擬人腹主動脈瘤組織的病理特點(diǎn)。
　　 (3)西洛他唑可能通過抑制NF-κB活性、下調(diào)MMP-2，9的表達(dá)及活性

10、、IL-6的水平以減少腹主動脈炎癥和保護(hù)彈力纖維，通過降低NADPH氧化酶活性及其產(chǎn)物ROS的水平以減少腹主動脈的氧化壓力等機(jī)制發(fā)揮其抑制大鼠腎下型腹主動脈瘤發(fā)生的作用。
　　 第三章西洛他唑影響大鼠腎下型腹主動脈瘤進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的：檢驗(yàn)西洛他唑?qū)Υ笫竽I下型腹主動脈瘤進(jìn)展的作用并初步探討其影響機(jī)制。
　　 方法：將24只SD大鼠隨機(jī)分為2組：生理鹽水治療組(12只，灌注彈力蛋白酶)、西洛他唑治療組(12

11、只，灌注彈力蛋白酶)，于術(shù)后1周開始每天分別給予生理鹽水灌胃和西洛他唑(100mgkg-1d-1)灌胃，并在術(shù)前、術(shù)后1、2、3、4、5周通過彩色超聲診斷儀測量腹主動脈的尺寸以檢驗(yàn)西洛他唑?qū)Υ笫竽I下型腹主動脈瘤進(jìn)展的影響。術(shù)后5周收集腹主動脈組織和血標(biāo)本，檢測動脈瘤組織彈力纖維、MMP-9的mRNA、蛋白表達(dá)、NF-κB的活性、NADPH氧化酶活性和其產(chǎn)物ROS的水平、血循環(huán)IL-6水平。
　　 結(jié)果：術(shù)后2周西洛他唑治療組大鼠

12、腹主動脈橫截面積即開始明顯低于生理鹽水治療組(P<0.001)，以后兩組差距逐漸增大，術(shù)后5周時西洛他唑治療組橫截面積約為生理鹽水治療組的2/3。西洛他唑治療組彈力纖維保有量明顯高于生理鹽水治療組，而MMP-9的mRNA、蛋白表達(dá)、NF-κB的活性、NADPH氧化酶活性和其產(chǎn)物ROS的水平、血循環(huán)IL-6水平等均明顯低于生理鹽水治療組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)西洛他唑可以抑制大鼠腎下型腹主動脈瘤的進(jìn)展