復(fù)方ItterfilBaras的工藝優(yōu)化及對A375細(xì)胞的作用研究.pdf

1、目的：對復(fù)方依特日非力白熱斯的工藝進(jìn)行優(yōu)化，通過體外培養(yǎng)正常人黑素細(xì)胞及血清藥理學(xué)方法，研究維吾爾藥復(fù)方依特日非力白熱斯含藥血清對細(xì)胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素顆粒合成的影響；探討復(fù)方依特日非力白熱斯對黑素細(xì)胞的作用及闡述其治療白癜風(fēng)的可能機(jī)理。
　　方法：采用正交設(shè)計，優(yōu)化復(fù)方依特日非力白熱斯的制備工藝；以不同劑量給大鼠持續(xù)灌藥3天，于末次給藥1h，2h，3h，4h采血，制備含藥血清，加入體外培養(yǎng)正常人黑素細(xì)胞體系，分別采用四甲基

2、偶氮唑藍(lán)比色法(MTT)和多巴速率氧化法測定含藥血清對A375黑素細(xì)胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素顆粒合成的影響。
　　結(jié)果：同一劑量持續(xù)給藥3天，末次給藥后分別于1h，2h，3h，4h采血，各組含藥血清均可促進(jìn)A375細(xì)胞增殖；末次給藥后1h的含藥血清促進(jìn)A375黑素細(xì)胞增殖作用最明顯，與對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；而末次給藥2h、3h、4h后含藥血清的作用逐漸減弱。提取組及粉碎組各劑量含藥血清均有促進(jìn)A375細(xì)胞增殖

3、的作用，并呈劑量依賴性；提取物高劑量組(2.250g/kg)、中劑量組(1.125g/kg)均優(yōu)于生藥粉碎組。與對照組相比，提取物中、高劑量組均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。提取組及粉碎組各劑量含藥血清均可提高A375細(xì)胞酪氨酸酶活性，與對照組相比，各給藥組均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，并呈劑量依賴性。與對照組相比，提取組高(2.250g/kg)、中(1.125g/kg)、低(0.563g/kg)以及粉碎高劑量組能夠極顯著提高酪氨酸酶

4、活性(P<0.01)。提取組及粉碎組各劑量含藥血清均可增加A375細(xì)胞黑素顆粒含量；與對照組相比，粉碎組高(2.250g/kg)、中(1.125g/kg)、低(0.563g/kg)3個劑量組隨著藥物濃度的增加，黑素含量也明顯升高；而提取組的低(0.563g/kg)劑量組在促進(jìn)黑素顆粒生成的作用最強(qiáng)。與對照組相比，各給藥組均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。
　　結(jié)論：通過工藝優(yōu)化可以充分提取各藥材中的有效部位(群)，能夠明顯提高復(fù)方依