二氧化氯對(duì)杭白菜采后軟腐病的抑制效果及其貯藏品質(zhì)的研究.pdf

1、以杭白菜軟腐病果膠桿菌（pectobacterium）為供試菌，分別采用二氧化氯氣體與液體兩種方式在離體條件下對(duì)果膠桿菌進(jìn)行處理。用LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行搖床培養(yǎng)，并測(cè)定其在600 nm波長(zhǎng)下的吸光度值，繪制果膠桿菌生長(zhǎng)曲線；通過(guò)對(duì)果膠桿菌進(jìn)行LB平板培養(yǎng)，觀察并記錄其存活率；采用處理后的果膠桿菌，分別測(cè)定二氧化氯處理對(duì)果膠桿菌細(xì)胞膜透性以及細(xì)胞滲出可溶性蛋白質(zhì)含量的影響；采用細(xì)胞壁降解酶誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)果膠桿菌進(jìn)行搖床培養(yǎng)，研究不同處理方式以

2、及不同濃度的二氧化氯抑菌活性以及相關(guān)機(jī)理的研究；通過(guò)活體接種實(shí)驗(yàn)，研究二氧化氯對(duì)果膠桿菌致病力的影響；經(jīng)過(guò)二氧化氯處理的杭白菜，貯藏期間發(fā)病情況及貯藏品質(zhì)研究。研究結(jié)果如下：
　　1、二氧化氯處理可顯著抑制果膠桿菌的生長(zhǎng)速度，降低存活率，使果膠桿菌的細(xì)胞膜透性增大，細(xì)胞滲出的可溶性蛋白質(zhì)含量增加，且處理效果與濃度呈正相關(guān)。采用LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)20 h后，1.50 mg/L二氧化氯氣體處理的細(xì)菌濃度最小，抑制率為70.10％，1.

3、00 mg/L二氧化氯液體處理的抑制率為66.6%。其中，采用1.50 mg/L二氧化氯氣體處理對(duì)果膠桿菌的抑制效果最好，存活率為11.96%。二氧化氯處理的濃度越高，果膠桿菌的細(xì)胞膜透性增大，膜滲透率升高，細(xì)菌細(xì)胞膜滲透率的變化主要在前30 min，30 min以后對(duì)照組、0.25 mg/L、0.5 mg/L、0.75 mg/L處理組的細(xì)菌細(xì)胞膜滲透率趨于穩(wěn)定。而1.00 mg/L處理組的細(xì)胞膜滲透率繼續(xù)增加，于120 min后趨于穩(wěn)

4、定。采用考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定果膠桿菌的細(xì)胞滲出可溶性蛋白含量，發(fā)現(xiàn)其可溶性蛋白含量與二氧化氯處理濃度呈正相關(guān)，其中，1.50 mg/L氣體處理、1.00 mg/L液體處理的可溶性蛋白含量與對(duì)照組有極顯著性差異（P<0.01），表明二氧化氯處理能夠作用于果膠桿菌的細(xì)胞膜，破壞其選擇滲透性，影響細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)交換，使細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)滲漏，從而抑制其生長(zhǎng)。
　　2、二氧化氯處理能夠抑制人工接種果膠桿菌的杭白菜莖段的發(fā)病情況，抑制病斑直徑，

5、降低發(fā)病率。在接種后20 h，對(duì)照組的杭白菜莖段已全部發(fā)病，0.14 mg/L、0.57 mg/L、1.00 mg/L和1.50 mg/L處理組的病情指數(shù)分別為45%、25%、15%、5%。另一方面，二氧化氯處理能夠有效抑制果膠桿菌的細(xì)胞壁降解酶活性，二氧化氯氣體處理后的果膠酶、聚甲基半乳糖醛酸酶、羧甲基纖維素酶和β-葡萄糖苷酶活性峰值比二氧化氯液體處理的峰值延遲一天。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，果膠酶系活性較纖維素酶系的活性高，且峰值出現(xiàn)較早，說(shuō)明

6、果膠酶是果膠桿菌侵染杭白菜的主要致病酶。
　　3、杭白菜為綠葉蔬菜，采用二氧化氯液體處理會(huì)導(dǎo)致水分殘留，給后續(xù)貯藏造成較嚴(yán)重影響，所以，實(shí)驗(yàn)采用二氧化氯氣體處理，研究其對(duì)杭白菜貯藏品質(zhì)的影響，首先取濃度為1.01 mg/mL、4.03 mg/mL和7.02 mg/mL的二氧化氯溶液各10.00 mL，分別噴灑于三個(gè)70.00 L的密閉保鮮箱中，迅速放入5.00 kg杭白菜，密閉處理30 min，實(shí)驗(yàn)最終的二氧化氯氣體濃度為0.14

7、 mg/mL、0.57 mg/mL和1.00 mg/L，以蒸餾水作對(duì)照。二氧化氯處理后，置于2±1℃、濕度85.00-95.00%冷庫(kù)中貯藏，同時(shí)測(cè)定其貯藏過(guò)程中生理生化指標(biāo)的變化規(guī)律。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，0.57 mg/L的二氧化氯處理杭白菜30 min是本實(shí)驗(yàn)中的最佳處理組，該處理?xiàng)l件對(duì)杭白菜的失水有明顯的抑制作用；可有效延緩可溶性固形物、葉綠素和維生素 C含量的降低；減輕細(xì)胞膜脂過(guò)氧化作用；抑制多酚氧化酶（PPO）與過(guò)氧化物酶（POD）活性