快速檢測(cè)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥的酶生物傳感器研究.pdf

1、近年來(lái)，農(nóng)藥殘留問(wèn)題越來(lái)越多的受到人們的關(guān)注。盡管國(guó)家有關(guān)部門三令五申禁止將有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中的高毒、劇毒品種用于蔬菜果品的生產(chǎn)，但全國(guó)不少地區(qū)仍在使用像甲胺磷、對(duì)硫磷、氧化樂(lè)果和呋喃丹等高毒高殘留農(nóng)藥，而且因食用含大量農(nóng)殘的蔬菜所引起的人畜中毒事件也時(shí)有發(fā)生，帶來(lái)了嚴(yán)重的食品安全問(wèn)題。因此，針對(duì)我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品小規(guī)模、分散式的產(chǎn)銷特點(diǎn)，研究和開(kāi)發(fā)適合我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)銷特點(diǎn)的簡(jiǎn)便、快速、靈敏、實(shí)用的檢測(cè)技術(shù)是控制當(dāng)前農(nóng)藥殘留的當(dāng)務(wù)之急。

2、 酶生物傳感器法用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)是目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一。如何能使傳感器具有令人滿意的靈敏度，關(guān)鍵就是保證固定化的膜片上有足夠量高活性酶。本研究首次采用了我國(guó)特產(chǎn)的魔芋中提取的魔芋葡甘聚糖作為植物酯酶的固定化載體，利用魔芋葡甘聚糖良好的生物相容性和成膜性制備出一種功能性酶膜，并作為生物傳感器的敏感元件，通過(guò)待測(cè)體系pH值的變化就可對(duì)樣品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行定量分析。研究結(jié)果和內(nèi)容如下： (1)設(shè)計(jì)了一種簡(jiǎn)單易行的KGM的純化

3、方法，采用的試劑主要是水和乙醇，毒性小、無(wú)污染、易回收，提取出的KGM產(chǎn)品純度可達(dá)89.61％，完全能滿足進(jìn)一步制備功能性酶膜的要求。 (2)采用添加Na<,2>CO<,3>改性，能有效去除KGM分子中的乙?；?，當(dāng)KGM溶膠濃度為1％，pH為10，增塑劑添加量為1％時(shí)，成膜效果最佳。與未改性膜相比，抗水性及耐洗刷性能得到明顯改善，且膜表面均勻度高于未改性膜。 (3)首次采用魔芋葡甘聚糖固定化植物酯酶，通過(guò)正交試驗(yàn)確定了K

4、GM植物酯酶膜的最佳制備條件為：干燥溫度為25℃，體系pH為9.0，BSA添加量為20μL，干燥時(shí)間為7小時(shí)。酶活回收率可達(dá)到50％左右，明顯優(yōu)于采用硝酸纖維素膜固定化植物酯酶。 (4)建立了植物酯酶生物傳感器對(duì)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，即：5mL待測(cè)樣品于自制平底試管中，插入傳感器電極反應(yīng)20min后加入250μLa-乙酸萘酯，立即測(cè)定pH值，再將平底試管放入40℃水浴中反應(yīng)20min，降至室溫并測(cè)定此時(shí)pH值，同時(shí)以參比電極作對(duì)照