21型糖尿病大鼠腎臟SUMO4、NF-kB、IkB表達(dá)情況的研究.pdf

1、目的：
　　 通過對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟SUM04、NF-κB、IκB的表達(dá)情況的觀察,并與正常大鼠的三者表達(dá)情況進(jìn)行對(duì)比,從而推斷SUMO化對(duì)依賴NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性的抑制性可能在2型糖尿病大鼠腎臟中存在,進(jìn)而推斷SUMO化可能成為抑制糖尿病腎臟微血管病變的一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。
　　 方法：
　　 取10只40周齡的SPF級(jí)雄性GK大鼠,10只40周齡的SPF級(jí)雄性Wistar大鼠。1.通過HE染色法在光鏡下觀察4

2、0周齡的GK大鼠及Wistar大鼠腎臟的情況。2.通過免疫組化法觀察NF-κB、Iκ B及SUM04在GK大鼠及正常Wistar大鼠腎臟中的表達(dá)情況。3.對(duì)GK大鼠及Wistar大鼠進(jìn)行腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)、鑒定及傳代培養(yǎng)。4.利用免疫熒光染色方法,通過激光共聚焦顯微鏡成像系統(tǒng),觀察SUM04與Iκ B、SUM04與NF-κ B在GK大鼠及正常Wistar大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)及共定位情況。
　　 結(jié)果：
　　

3、本研究通過HE染色法觀察到40周齡時(shí)GK大鼠的腎臟腎小球毛細(xì)血管球肥大,基底膜輕度增厚,腎小球系膜細(xì)胞增生、肥大,腎小管上皮細(xì)胞肥大;通過免疫組化法觀察到GK大鼠腎臟在組織水平上NF-κ B、Iκ B及SUM04的表達(dá)水平明顯高于正常Wsitar大鼠腎臟;腎小球內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)成功,并鑒定是內(nèi)皮細(xì)胞;在腎小球內(nèi)皮細(xì)胞水平上通過免疫熒光染色方法進(jìn)一步證明GK大鼠的腎臟NF-κ B、Iκ B及SUM04的表達(dá)水平均明顯高于正常Wsitar大