鹽誘導(dǎo)激酶1在2型糖尿病腎病伴高血壓中的作用.pdf

1、目的：
　　 觀察糖尿病腎病伴高血壓大鼠腎組織鹽誘導(dǎo)激酶1（Salt-inducible kinase 1,SIK1）、Na+,K+-ATPase α1的表達(dá)和鈉鉀ATP酶活性，同時(shí)觀察星形孢菌素（staurosporine）對(duì)SIK1表達(dá)的影響，格列喹酮對(duì)糖尿病腎病伴高血壓的保護(hù)作用及對(duì)SIK1表達(dá)的調(diào)控作用。
　　
　　 方法:
　　 通過(guò)高脂飲食結(jié)合45mg/kgSTZ 腹腔注射誘導(dǎo)建立2型糖尿病

2、大鼠模型。將雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組（10只）、模型組（10只）、Staurosporine組（9只）和格列喹酮治療組（9只），連續(xù)給藥12周。觀測(cè)空腹血糖（FBG）、餐后血糖（PBG）、血脂（TG、TC）、血清胰島素（FINS）、24h尿量、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）、、尿微量白蛋白（UAE），并計(jì)算胰島素敏感指數(shù)（ISI）和內(nèi)生肌酐清除率（Ccr），同時(shí)檢測(cè)大鼠尾動(dòng)脈血壓。處死大鼠，觀察腎重指數(shù)（KI），HE染

3、色觀察腎臟的病理變化；通過(guò)免疫組化法檢測(cè)SIK1蛋白的表達(dá)；利用RT-PCR方法檢測(cè)SIK1、鈉鉀ATP酶α1 mRNA表達(dá)；同時(shí)檢測(cè)腎臟鈉鉀ATP酶活性。
　　 結(jié)果：
　　 1.高脂飼料喂養(yǎng)4周后，與正常對(duì)照組比較，造模組大鼠的TG、TC、FINS明顯增加（P<0.05，P<0.01），ISI明顯降低（P<0.05），而FBG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；STZ注射一周后，造模組大鼠的FBG顯著增高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義（P<0.01）。
　　 2.與正常對(duì)照組比較，模型組FBG、PBG、TG、TC均顯著增高（P<0.01）；與模型組比較，Staurosporine組FBG、PBG、TC均降低（P<0.01或P<0.05），TG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；格列喹酮組大鼠FBG、TG、TC均降低（P<0.01或P<0.05），PBG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 3.與正常對(duì)照組比較，模型組的血壓從成模后第6周開(kāi)始增高

5、，持續(xù)到第12周（P<0.05）；與模型組比較，Staurosporine組和格列喹酮治療組大鼠血壓均降低（P<0.05）。
　　 4.與正常對(duì)照組比較，模型組Ccr顯著降低（P<0.01），UAE、KI顯著增高（P<0.01）；與模型組比較，Staurosporine組和格列喹酮治療組Ccr顯著增高（P<0.01），UAE、KI明顯降低（P<0.05）。
　　 5.病理結(jié)果顯示：正常組大鼠腎小球毛細(xì)血管襻開(kāi)放、腎小管結(jié)

6、構(gòu)正常；模型組大鼠出現(xiàn)不同程度的腎小球增大，腎小球囊腔變寬，系膜區(qū)面積的增寬，腎小球基底膜（GBM)增厚，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，腎小管管腔變窄，腎間質(zhì)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)；Staurosporine組和格列喹酮組腎小球、腎小管腫脹程度減輕，基底膜增厚程度改善，病理變化呈現(xiàn)不等程度的減輕。
　　 6.與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠腎臟組織SIK1 mRNA和SIK1蛋白表達(dá)顯著增加（P<0.01），Na+-K+-ATPase α1 mRNA

7、表達(dá)顯著增加（P<0.01）及鈉鉀ATP酶活性顯著增加（P<0.01）；與模型組比較，Staurosporine組SIK1 mRNA、SIK1蛋白及鈉鉀ATP酶活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），格列喹酮組上述各項(xiàng)指標(biāo)均降低（P<0.01，P<0.05）。
　　
　　 結(jié)論
　　 2型糖尿病腎病伴高血壓大鼠模型組腎組織SIK1 mRNA和蛋白的表達(dá)升高，可能自身或通過(guò)調(diào)節(jié)鈉鉀ATP酶活性的作用，與糖尿病腎病伴