大鼠腎缺血再灌注損傷后內(nèi)源性轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-,1-表達(dá)的變化.pdf

1、目的：通過(guò)建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型，觀察腎臟缺血再灌注不同時(shí)間點(diǎn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β<,1>(TGFβ<,1>)在腎小管上皮細(xì)胞及腎小球中的表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。探討TGFβ<,1>在腎缺血再灌注損傷中的意義及作用，為臨床防治缺血再灌注損傷提供理論依據(jù)。 方法：采用雙側(cè)腎蒂夾閉模型，將SD大鼠隨機(jī)分成：①正常對(duì)照組(假手術(shù)組)：n=6，僅分離雙側(cè)腎蒂，取正常組織做對(duì)照。②缺血組(再灌注0小時(shí)組)：n=6，雙側(cè)腎蒂阻斷45min，即持續(xù)

2、缺血45min。③再灌注2h組：雙側(cè)腎蒂夾閉45min后重新開(kāi)放，恢復(fù)血流灌注2h。④再灌注4h組：雙側(cè)腎蒂夾閉45min后重新開(kāi)放，恢復(fù)血流灌注4h。⑤再灌注12h組：雙側(cè)腎蒂夾閉45min后重新開(kāi)放，恢復(fù)血流灌注12h。⑥再灌注24h組：雙側(cè)腎蒂夾閉45min后重新開(kāi)放，恢復(fù)血流灌注24h。處死大鼠前腹主動(dòng)脈取血測(cè)血肌酐，尿素氮。留取腎臟組織，行腎臟組織病理學(xué)檢查，免疫組化(SABC)法測(cè)TGFβ<,1>蛋白，RT-PCR法測(cè)TGF

3、β<,1>mRNA。 結(jié)果：1．缺血再灌注后腎臟出現(xiàn)病理改變，腎小管上皮細(xì)胞刷狀緣脫落，管腔擴(kuò)張，在12h病理改變最重，可見(jiàn)管型，間質(zhì)充血，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。24h時(shí)病理改變明顯減輕。2．缺血再灌注后腎功能出現(xiàn)損害并隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸加重，24h損害最重。3．正常腎臟組織中有少量TGFβ<,1>mRNA及蛋白的表達(dá)，主要在腎小管上皮細(xì)胞中，腎小球中極少量。與正常對(duì)照組相比，缺血45min組、再灌注2h組、再灌注4h組和再灌注

4、12h組的腎組織中TGFβ<,1>基因表達(dá)增加，差異有顯著性(P<0.05)；再灌注24h后TGFβ<,1>基因表達(dá)基本恢復(fù)，與正常對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論：1．大鼠腎缺血-再灌注損傷后，TGFβ<,1>mRNA及蛋白的表達(dá)量隨損傷時(shí)間不同而變化，反映了損傷早期炎癥反應(yīng)程度。2．內(nèi)源性轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βl在早期的炎癥反應(yīng)以及后期的組織修復(fù)中起重要作用。3．應(yīng)用外源性TGFβ<,1>蛋白進(jìn)行灌注或轉(zhuǎn)基因技術(shù)增加缺