連萸煎劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管重塑的干預(yù)研究.pdf

1、研究目的：1.運(yùn)用電生理技術(shù)對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)進(jìn)行頸動(dòng)脈血壓測(cè)量，為中藥連萸煎劑降壓療效提供依據(jù)。2.運(yùn)用顯微鏡計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)對(duì)SHR主動(dòng)脈及腸系膜三級(jí)動(dòng)脈的中膜厚度、管腔直徑進(jìn)行測(cè)量，并計(jì)算中膜厚度/管腔直徑，探討連萸煎劑對(duì)高血壓血管重塑的干預(yù)作用。3.運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)SHR主動(dòng)脈血管壁VEGF、IGF-1、ERK-2的蛋白表達(dá)，探討連萸煎劑對(duì)SHR血管重塑干預(yù)的作用機(jī)制。 研究方法：選用13周的SHR2

2、4只，WKY8只。24只SHR隨機(jī)分為模型組(Model組)、硝苯地平組(Nif組)和LY組(LY組)，每組共8只，雌雄各半；8只WKY大鼠為正常對(duì)照組(WKY組)，雌雄各半。Model組予0.9％生理鹽水，Nif組予硝苯地平溶液，LY組以中藥連萸煎劑濃縮液，均為每天灌胃1次，連續(xù)四周。四周后，動(dòng)物經(jīng)40 mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，剪開(kāi)頸部皮毛，分離肌肉，暴露右頸外動(dòng)脈，右頸外動(dòng)脈一端結(jié)扎，在距離結(jié)扎處3mm剪開(kāi)一小口，自切口

3、處插入PE50小鞘管，并與BL-820生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)相連，記錄大鼠頸動(dòng)脈收縮壓(SBP)及舒張壓(DBP)。之后插管進(jìn)入左心室，同時(shí)剪開(kāi)右心耳形成灌注液的引流通道，自插管注射4％多聚甲醛300ml灌注固定。經(jīng)30min灌注完畢后迅速開(kāi)胸、腹腔，分別取主動(dòng)脈6mm、腸系膜三級(jí)動(dòng)脈4mm放入固定液(4％多聚甲醛)20ml中固定24h。而后脫水、透明和石蠟包埋。制成4 μm主動(dòng)脈切片，后行HE染色。光鏡下觀察主動(dòng)脈及腸系膜三級(jí)動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變

4、，并用數(shù)碼攝像顯微鏡計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)測(cè)量大鼠主動(dòng)脈及腸系膜三級(jí)動(dòng)脈的中膜厚度、管腔直徑，分別計(jì)算其中膜厚度/管腔直徑。運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定大鼠主動(dòng)脈血管壁VEGF、IGF-1、ERK-2的蛋白表達(dá)。 研究結(jié)果： 1.與WKY組比較，Model組頸動(dòng)脈DBP、SBP升高，分別有極顯著性差異和顯著性差異(P(0.01或P<0.05)。與Model組比較，LY組、Nif組大鼠頸動(dòng)脈DBP、SBP均降低，有顯著性差異(P<

5、0.05)。 2.WKY組主動(dòng)脈管壁內(nèi)膜、中膜無(wú)增厚，管腔相對(duì)較大。Model組主動(dòng)脈管壁增厚，以中膜增厚為主，管腔較WKY狹窄，中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，中膜平滑肌細(xì)胞層數(shù)增多，各彈力纖維層扭曲明顯。與Model比較，Nif組及LY組主動(dòng)脈管壁內(nèi)膜、中膜厚度變薄，管腔狹窄程度有所緩解。與WKY組比較，Model組、Nif組主動(dòng)脈血管壁中膜厚度/管腔直徑增高，有極顯著性差異(P<0.01)。與Model組比較，LY組及Nif組主動(dòng)

6、脈血管壁中膜厚度/管腔直徑均有所降低，有顯著性差異(p<0.05)。 3.WKY組腸系膜三級(jí)動(dòng)脈管壁內(nèi)膜、中膜無(wú)增厚，管腔相對(duì)較大。Model組腸系膜三級(jí)動(dòng)脈管壁增厚，以中膜增厚為主，管腔較WKY組狹窄。與Model比較，Nif組、LY組腸系膜三級(jí)動(dòng)脈管壁內(nèi)膜、中膜厚度變薄，管腔狹窄程度有所緩解。與WKY比較，Model組、Nif組腸系膜三級(jí)動(dòng)脈管壁中膜厚度/管腔直徑增高，有極顯著性差異(P<0.01)。與Model組比較， N

7、if組及LY組腸系膜三級(jí)動(dòng)脈管壁中膜厚度/管腔直徑均有所降低，分別有顯著差異和極顯著性差異(P

8、.01)。與Model組比較，Nif組、LY組IGF-1蛋白表達(dá)下調(diào)，分別有顯著性差異和極顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。 6.與WKY組比較，Model組主動(dòng)脈ERK-2蛋白表達(dá)上調(diào)，有極顯著差異(P<0.01)。與Model組比較，Nif組、LY組主動(dòng)脈ERK-2蛋白表達(dá)下調(diào)，分別有顯著性差異和極顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。 研究結(jié)論：中藥連萸煎劑能夠降低SHR血壓；抑制SHR主動(dòng)脈、腸系膜三