C-EBPα和C-EBPβ基因影響子宮頸癌HeLa細胞增殖和侵襲的研究.pdf

1、目的：通過研究C/EBPα和C/EBPβ基因對子宮頸癌HeLa細胞增殖和侵襲能力的的影響，對深入了解其在子宮頸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用提供新的線索，為子宮頸癌的診斷、治療提供新的靶點和研究方向。
　　方法：1、分別抽提C/EBPα和C/EBPβ質粒，然后用脂質體法分別轉染到子宮頸癌HeLa細胞。2、應用免疫熒光方法評價C/EBPα和C/EBPβ蛋白質表達水平。3、實驗按干預因素不同分重組質粒組（轉染pcDNA3.1-C/EBPα的

2、HeLa細胞）、重組質粒組（轉染pcDNA3.1-C/EBPβ的HeLa細胞）、空質粒組（轉染pcDNA3.1的HeLa細胞）、對照組（未轉染質粒的HeLa細胞）、用免疫組織化學的方法檢測各組核蛋白Ki-67觀察細胞增殖情況、用MTT觀察細胞增殖情況、基質膠侵襲實驗分析細胞遷移能力、掃描電子顯微鏡下觀察細胞形態(tài)。
　　結果：1、免疫熒光結果顯示：重組質粒組熒光蛋白質表達含量明顯高于空質粒組和對照組，而空質粒組和對照組蛋白表達無差異

3、。2、免疫組化Ki-67結果顯示：重組質粒組Ki-67蛋白表達明顯低于空質粒組和對照組，而空質粒組和對照組Ki-67蛋白表達無顯著差異。3、MTT結果顯示：重組質粒組增殖率明顯低于空質粒組和未轉染HeLa細胞組。轉染C/EBPα組的吸光度值為0.21±0.01，轉染空質粒組的吸光度值為0.24±0.01，未轉染組的吸光度值為0.24±0.02，轉染重組質粒組與空質粒組和未轉染組比較差異有統(tǒng)計學意義（F=17.219，P=0.000），空

4、質粒組和未轉染組比較無統(tǒng)計學意義（P=0.155)。轉染C/EBPβ組的吸光度值為0.38±0.12，轉染空質粒組的吸光度值為0.59±0.17，未轉染組的吸光度值為0.68±0.17，轉染重組質粒組與空質粒組和未轉染組比較差異有統(tǒng)計學意義（F=9.769，P=0.001)，空質粒組和未轉染組比較無統(tǒng)計學意義（P=0.230)。4、基質膠侵襲實驗結果顯示：重組質粒組與空質粒組和未轉染組相比,細胞遷移能力減弱。轉染C/EBPα組的細胞穿膜

5、數為12±2.2，轉染空質粒組的細胞穿膜數為39±3.2，未轉染組的細胞穿膜數為39.6±2.6，轉染重組質粒組與空質粒組和未轉染組比較差異有統(tǒng)計學意義（F=171.00，P=0.000)，空質粒組和未轉染組比較無統(tǒng)計學意義（P=0.731)。轉染C/EBPβ組的細胞穿膜數為16±2.3，轉染空質粒組的細胞穿膜數為39±3.2，未轉染組的細胞穿膜數為39.6±2.6，轉染重組質粒組與空質粒組和未轉染組比較差異有統(tǒng)計學意義（F=121.7