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1、本論文采用PCR和DNA測(cè)序技術(shù)和生物信息學(xué)方法測(cè)定并分析了來(lái)自中國(guó)南方6個(gè)省/自治區(qū)的9個(gè)地方黃牛群體共計(jì)66個(gè)個(gè)體的mtDNA D-100p區(qū)全序列。同時(shí),為了分析我國(guó)南方黃牛品種的遺傳多態(tài)性、品種間的親緣關(guān)系以及母系起源,從GenBank下載另外17個(gè)南方黃牛群體的124條mtDNA D-100p區(qū)全序列。將這兩方面數(shù)據(jù)集合起來(lái),共26個(gè)南方黃牛群體190條D-100p全序列經(jīng)多序列比對(duì)分析,獲得如下結(jié)果: 1、南方9個(gè)黃
2、牛群體66個(gè)個(gè)體的D-100p區(qū)共檢測(cè)到71個(gè)核苷酸替代突變位點(diǎn),約占核苷酸總數(shù)的7.8%,按信息位點(diǎn)類型分,單態(tài)突變位點(diǎn)(singleton variable sites)21個(gè),簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)(parsimony informative sites)50個(gè);按突變類型分,轉(zhuǎn)換位點(diǎn)65個(gè),顛換位點(diǎn)6個(gè),轉(zhuǎn)換和顛換之比為10.8,轉(zhuǎn)換與顛換存在1處,插入與缺失在存4處。黃牛D-100p 5個(gè)不同區(qū)域:1~240bp,241~610bp,6
3、11~712bp,713~850bp與851~910bp的多態(tài)核苷酸出現(xiàn)頻率分別為:13.16%,65.7%,2.63%,15.79%,2.63%。66個(gè)個(gè)體的平均核苷酸差異數(shù)(K)為21.758,核苷酸多樣度(兀)為.2.399%。 2、66個(gè)南方黃牛個(gè)體mtDNA D-100p區(qū)全序列的71個(gè)核苷酸替代突變共定義了30個(gè)單倍型,單倍型多樣度(Hd)為0.8399±0.044,其中包括20個(gè)普通牛類型和10個(gè)瘤牛類型。26個(gè)普
4、通牛個(gè)體在20個(gè)單倍型中的分布比較均勻,單倍型多樣度Hd為0.960,反映出十分豐富的多樣性。40個(gè)瘤牛中有26個(gè)個(gè)體被共享一種單倍型i1,單倍型多樣度為O.5731,與普通牛相比低很多。基于Kimura-2-parameter遺傳距離構(gòu)建南方9個(gè)黃牛群體D-100p區(qū)單倍型的NJ分子系統(tǒng)樹(shù),30個(gè)單倍型明顯的分為2個(gè)大支,分別代表普通牛和瘤牛。 3、南方9個(gè)黃牛群體中,云南昭通牛、四川涼山牛單倍型多樣度最大,與其它黃牛群體的遺
5、傳距離最大,江西錦江牛、湖南湘西牛單倍型多樣度最小,群體內(nèi)遺傳差異最小,兩者之間的遺傳距離最?。换贙imura-2-parameter遺傳距離構(gòu)建南方9個(gè)黃牛群體D-100p區(qū)親緣關(guān)系分子系統(tǒng)樹(shù),四川平武牛顯示出不同的聚類情況。 4、南方26個(gè)黃牛群體mtDNA D-100p區(qū)共檢測(cè)到了111個(gè)核苷酸替代突變位點(diǎn),約占核苷酸總數(shù)的12.2%,其中單態(tài)突變位點(diǎn)41個(gè),簡(jiǎn)約信息位點(diǎn)70個(gè),轉(zhuǎn)換發(fā)生92處,顛換18處,轉(zhuǎn)換和顛換之比
6、為5.11,轉(zhuǎn)換與顛換共存4處,插入與缺失存在7處,D-100p 5個(gè)不同區(qū)域:1~240 bp,241~610 bv,611~712 bp,713~850 bp與851~910bp的多態(tài)核苷酸出現(xiàn)頻率分別為:22.88%,53.39%,1.70%,14.41%,7.63%,190條序歹0的平均核苷酸差異數(shù)(K)為22.518,核苷酸多樣性(兀)為2.510%,190個(gè)個(gè)體經(jīng)對(duì)比后顯示出77個(gè)單倍型,平均單倍型多樣度(Hd)為0.873
7、±0.022?;贙imura-2一parameter遺傳距離構(gòu)建26個(gè)南方南方黃牛群體mtNA D-100p區(qū)77個(gè)單倍型的分子系統(tǒng)樹(shù),77個(gè)單倍型明顯的聚為2個(gè)分支,分別是80個(gè)普通牛個(gè)體所擁有的47個(gè)單倍型和110個(gè)瘤牛個(gè)體所擁有的30個(gè)單倍型。與非洲瘤牛、巴厘牛、斑騰牛的比較中,發(fā)現(xiàn)一個(gè)黃牛個(gè)體(宣漢.A7)與巴厘牛的親緣關(guān)系較近,說(shuō)明在中國(guó)南方黃牛形成的過(guò)程中,曾經(jīng)有限度的受到巴厘牛的影響,但影響不大;沒(méi)有發(fā)現(xiàn)牦牛、斑騰牛的母
8、系血統(tǒng);四川群體多顯示出較特殊的聚類位置,提示四川群體的起源不止限于歐系普通牛和印系瘤牛這兩大古牛;云南高峰牛、貴州黎平牛的瘤牛部分不同于印度瘤牛。 5、南方26個(gè)黃牛群體中的80個(gè)普通牛分布在T2、T3、T4這3個(gè)單倍型組中。T2、T3、T4在普通牛中的比例分別是:16.25%、68.75%、15%;110個(gè)南方瘤牛分布在11、12兩個(gè)單倍型組中,屬于12的個(gè)體只有7個(gè),11、12在瘤牛中的比例分別是93.64%、6.36%。在11單
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