肺再血管化修復(fù)煙熏大鼠肺氣腫模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、肺氣腫是一種嚴(yán)重威脅人類健康的常見(jiàn)病，被認(rèn)為一旦發(fā)生則是持續(xù)永久不可逆而難以修復(fù)的。目前尚無(wú)有效的方法控制肺氣腫病變的進(jìn)展，故臨床只有對(duì)癥而無(wú)減輕肺氣腫病理改變的治療方法。在多年肺減容手術(shù)和支氣管腔內(nèi)栓堵治療肺氣腫的研究基礎(chǔ)上，李寶平教授提出肺毛細(xì)血管損傷可能參與肺氣腫發(fā)病機(jī)制的新假設(shè)：有害因素?fù)p傷肺泡毛細(xì)血管，致肺毛細(xì)血管床減少，肺血流量減少，肺通氣/血流比值增大，機(jī)體為使通氣/血流比值得以重新匹配，代償性地出現(xiàn)肺泡融合以減少肺泡彌散

2、面積，參與產(chǎn)生肺氣腫的病理改變。根據(jù)上述假設(shè)，若能促進(jìn)肺泡毛細(xì)血管的再生，亦即肺的再血管化，肺氣腫的病理改變?cè)谝欢ǔ潭壬鲜强梢孕迯?fù)的。 目的： 本實(shí)驗(yàn)利用煙熏加氣管內(nèi)滴注彈性蛋白酶制作大鼠肺氣腫模型，使用bFGF、VEGF、MSCs促進(jìn)肺毛細(xì)血管再生，驗(yàn)證我們的假設(shè)并探索其可能的機(jī)制；本研究將完善肺氣腫的發(fā)病理論，為治療肺氣腫提供新的思路和理論依據(jù)，并為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法： 第一部分采用健康8周

3、齡Wistar大鼠16只，體重180～200g，雌雄不限，隨機(jī)分為2組，每組8只，模型組(A組)和對(duì)照組(B組)，A組煙熏加氣管內(nèi)一次性滴入豬胰彈性蛋白酶(Porcine pancreatic elastase，PPE)方法誘發(fā)大鼠肺氣腫，B組氣管內(nèi)滴入生理鹽水作為對(duì)照，3個(gè)月后，通過(guò)動(dòng)脈血?dú)夥治?、肺泡形態(tài)學(xué)觀察，肺毛細(xì)血管測(cè)定等確認(rèn)肺氣腫是否復(fù)制成功，并對(duì)大鼠肺氣腫動(dòng)物模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。 第二部分采用健康8周齡Wistar大鼠48

4、只，體重180～200g，隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為bFGF組(A組)、VEGF組(B組)、MSCs組(C組)、VEGF+MSCs組(D組)、對(duì)照組(E組)和健康對(duì)照組(F組)。A、B、C、D和E組采用煙熏加氣管內(nèi)滴入PPE，F(xiàn)組大鼠滴入生理鹽水，3個(gè)月后模型復(fù)制成功。A、B組大鼠氣管內(nèi)分別滴入bFGF(400U/只)、VEGF(2ug/只)，每周1次，共3次。C組大鼠經(jīng)尾靜脈注入MSCs懸液0.5ml，濃度4.0x106，D組大鼠

5、氣管內(nèi)滴入VEGF 2ug/只(3次)并且尾靜脈注入MSCs(1次)，E、F組大鼠給與生理鹽水，4周后大鼠測(cè)體重，行動(dòng)脈血?dú)夥治觯^察肺泡形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法檢測(cè)肺組織肺毛細(xì)血管的變化。 結(jié)果： 1.大鼠經(jīng)煙熏加氣管內(nèi)滴入PPE，3個(gè)月后，病理學(xué)觀察出現(xiàn)慢性阻塞性肺氣腫的病理學(xué)表現(xiàn)，免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺毛細(xì)血管數(shù)明顯減少(P<0.05)。 2.bFGF、VEGF和MSCs均能促進(jìn)肺毛細(xì)血管的再生。治療組均觀察到了

6、平均肺泡數(shù)明顯增加(P<0.05)、平均肺泡間隔和平均肺泡面積明顯減小(P<0.05)，免疫組織化學(xué)檢測(cè)毛細(xì)血管數(shù)明顯增加(P<0.05)，肺氣腫病理學(xué)改善；動(dòng)脈血?dú)夥治觯篤EGF組動(dòng)脈氧分壓高與對(duì)照組(P<0.05)，其余組動(dòng)脈氧分壓高與對(duì)照組(但P>0.05)。 3.經(jīng)尾靜脈注入的MSCs定居到了肺組織內(nèi)。 結(jié)論： 1.bFGF、VEGF和MSCs能在一定程度上修復(fù)煙熏加氣管內(nèi)滴入彈性蛋白酶構(gòu)建的大鼠肺氣腫模