荷載SATB-1基因的干擾質粒對人前列腺癌裸鼠移植瘤生長的影響.pdf

1、目的：研究荷載SATB-1基因的干擾質粒(pSliencer-SATB-1-shRNA)對人前列腺癌細胞(DU145)裸鼠皮下移植瘤生長的影響，為進一步探討SATB-1基因在前列腺癌的發(fā)病機制及轉移中的作用奠定基礎，為前列腺癌的基因治療提供依據。
　　方法：建立裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型，當腫瘤生長到80-100 mm3（約注射細胞后10-14天），將其隨機分3組:分別為A組(PBS組，n=8):瘤體內多點注射磷酸鹽緩沖液(PBS

2、)0.1ml/只;B組（空質粒pSliencer組，n=8）:瘤體內多點注射單純空質粒pSliencer0.1ml/只; C組(pSliencer-SATB-1-shRNA組，n=8):瘤體內多點注射pSliencer-SATB-1-shRNA0.1ml/只。注射方案:分四次注射，隔天注射，每次0.1ml。在治療結束的第7天，每組隨機脫頸處死4只動物，取下瘤體組織，免疫組化法檢測瘤體內SATB-1蛋白的表達，Western檢測SATB-

3、1蛋白的表達，HE染色檢測腫瘤生長情況，TUNEL法檢測移植瘤細胞凋亡，其余動物繼續(xù)飼養(yǎng)，每隔三天測量腫瘤體積，繪制腫瘤時間-體積生長抑制曲線，在治療的第25天處死全部動物，測量腫瘤最終體積。
　　結果：1.成功構建人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤模型;
　　2.免疫組化法顯示:SATB-1蛋白表達的陽性顆粒主要位于細胞質和胞膜上，染色呈棕褐色。而pSliencer-SATB-1-shRNA組與PBS組及空質粒組其表達明顯降低，差異

4、有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　3.Western blot檢測示:PBS組與空質粒組SATB-1蛋白表達水平分別為(98.6±5.73,94.0±4.52)％，而pSliencer-SATB-1-shRNA組為（31.4±5.78)％。與兩對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　4.瘤組織HE染色中PBS組與空質粒組腫瘤組織生長旺盛，細胞核大小不一，形態(tài)不規(guī)則。而pSliencer-SATB-1-shRNA組

5、與兩對照組相比，瘤組織內死亡細胞較多，細胞崩裂為碎片，細胞核固縮碎裂，正常組織結構消失，提示腫瘤組織生長抑制;
　　5.TUNEL檢測各治療組凋亡率分別為PBS組(4.16±1.83)％，空質粒pSliencer組(6.84±3.16)％, pSliencer-SATB-1-shRNA組(58.23±6.62)％。pSliencer-SATB-1-shRNA組與兩對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　6.腫瘤生