IL-10、生長(zhǎng)抑素對(duì)大鼠重癥胰腺炎炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：重癥急性胰腺炎是一種臨床常見(jiàn)的急腹癥，不僅引發(fā)胰腺局部損害，而且從一開(kāi)始就是一個(gè)炎癥涉及全身多個(gè)臟器、多個(gè)系統(tǒng)改變的綜合癥，病情兇險(xiǎn)，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。90年代以來(lái)，已從胰酶自身消化學(xué)說(shuō)發(fā)展到細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)學(xué)說(shuō)。在重癥急性胰腺炎時(shí)，炎癥反應(yīng)促使體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞活化，并產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)。這些細(xì)胞因子再通過(guò)“二次反應(yīng)學(xué)說(shuō)”觸動(dòng)細(xì)胞因子反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)“扳機(jī)樣作用”觸發(fā)細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的“瀑布樣級(jí)聯(lián)反應(yīng)”，使更

2、多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集、活化，釋放更多細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，從而導(dǎo)致炎癥不斷擴(kuò)散、擴(kuò)大、惡化，最終導(dǎo)致全身性炎癥反應(yīng)綜合癥(Sirs)的發(fā)生。機(jī)體在釋放促炎因子的同時(shí)，也釋放抗炎細(xì)胞因子，促抗炎細(xì)胞因子之間存在一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡。而在病理狀態(tài)下顯然已失衡。所以在病理狀態(tài)下調(diào)整兩類細(xì)胞因子的平衡對(duì)治療重癥胰腺炎具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)的研究目的就是觀察生長(zhǎng)抑素、IL-10對(duì)AP時(shí)炎癥性細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8和抗炎性細(xì)胞因子IL-10、T

3、GF-β的調(diào)節(jié)作用，探討重癥胰腺炎的發(fā)病機(jī)理和治療方法。 方法：SD大鼠120只，體重300～350g,雌雄不限(河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供)隨機(jī)分為5組，每組30只。A組為對(duì)照組，B組為SAP組，C組為SAP+生長(zhǎng)抑素治療組D組為SAP+IL-10治療組，E組為自然死亡組。采用胰腺被膜下向胰管開(kāi)口方向緩慢注入5％?；悄懰徕c液的方法制作SAP動(dòng)物模型。于制膜后1、3、6、12小時(shí)，各組分別處死六只大鼠，取血清-80C保存待測(cè)，取胰

4、腺組織10％甲醛溶液固定，作石蠟切片備用。觀察項(xiàng)目包括胰腺大體標(biāo)本觀察、組織學(xué)觀察，胰腺濕重、血清淀粉酶、白細(xì)胞計(jì)數(shù)的測(cè)定，應(yīng)用ELISA法測(cè)定TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10、TGF-β值。 結(jié)果：1大體標(biāo)本所見(jiàn)：胰腺：A組無(wú)明顯變化。B組大鼠腹腔內(nèi)大量血性積液，胃腸極度擴(kuò)張，胰腺?gòu)V泛壞死，其程度隨時(shí)間延長(zhǎng)加重。C、D組大鼠腹腔內(nèi)積液較B組同時(shí)間段少，顏色較淡。胃腸擴(kuò)張較B組輕。胰腺點(diǎn)狀壞死。 2胰腺組織病理

5、學(xué)評(píng)分結(jié)果：3h后C組和D組病理學(xué)評(píng)分較B組為低，差別有顯著性。C組和D組各時(shí)間段病理學(xué)評(píng)分差別無(wú)顯著性。 3白細(xì)胞測(cè)定結(jié)果：6h和12h時(shí)間段B組白細(xì)胞計(jì)數(shù)較A組升高，差別有顯著性，C組和D組白細(xì)胞計(jì)數(shù)較B組為低，差別有顯著性。C組和D組各時(shí)間段白細(xì)胞計(jì)數(shù)差別無(wú)顯著性。 4血清淀粉酶測(cè)定結(jié)果：3h后B組血清淀粉酶值較A組升高，差別有顯著性。C組和D組血清淀粉酶值較B組為低，差別有顯著性。C組和D組各時(shí)間段血清淀粉酶值差

6、別無(wú)顯著性。5胰腺濕重測(cè)定結(jié)果：3h后B組胰腺濕重較A組升高，差別有顯著性。C組和D組胰腺濕重較B組為低，差別有顯著性。C組和D組胰腺濕重差別無(wú)顯著性。 6自然死亡時(shí)間：B組、C組和D組自然死亡時(shí)間較A組短，差別有顯著性。C組和D組自然死亡時(shí)間較B組長(zhǎng)，差別有顯著性。C組和D組自然死亡時(shí)間差別無(wú)顯著性。 7細(xì)胞因子測(cè)定結(jié)果：B組TNF-α、IL-6、IL-8值術(shù)后3h開(kāi)始升高，與A組差異有顯著性，C組和D組TNF-α、I

7、L-6、IL-8值比B組低差異有顯著性，C組和D組各時(shí)間段差別無(wú)顯著性。B組IL-10、TGF-B值12h后開(kāi)始升高與A組差異有顯著性，C組12h后IL-10、TGF-B值較B組低差異有顯著性。D組12h后IL-10、TGF-B值比C組高差異有顯著性。A組和D組IL-10、TGF-B值各時(shí)間段差別無(wú)顯著性 結(jié)論：1在急性重癥胰腺炎中有促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8及抗炎細(xì)胞因子IL-10、TGF-β的升高，其中抗炎細(xì)

8、胞因子的升高遲于促炎細(xì)胞因子。 2生長(zhǎng)抑素對(duì)急性重癥胰腺炎具有治療作用，其機(jī)制除抑制胰腺內(nèi)外分泌功能外，還可能是生長(zhǎng)抑素既抑制促炎細(xì)胞因子的釋放，也抑制抗炎細(xì)胞因子的釋放，使二者保持一種低水平的平衡狀態(tài)。 3外源性IL-10可以抑制促炎細(xì)胞因子TNF-α、IL-6、IL-8的釋放，對(duì)內(nèi)源性IL-10、TGF-β無(wú)明顯影響，對(duì)急性重癥胰腺炎具有治療作用，但同生長(zhǎng)抑素相比并不能延長(zhǎng)急性重癥胰腺炎大鼠的生存期，這可能與外源性I