橙色大白菜離體再生體系的建立及原生質(zhì)體分離.pdf

1、以橙色大白萊(Brassica campestris syn.rapa L.ssp.pekinensis(Lour)Olsson)優(yōu)良品系01S303-1等為試材，通過研究激素種類及其配比、硝酸銀、脫落酸以及苗齡、基因型對(duì)不定芽再生率的影響，不同生長(zhǎng)素對(duì)不定根再生的影響，建立了子葉再生體系。研究了植株苗齡、酶液濃度、酶解時(shí)間以及甘露醇濃度等對(duì)大白菜子葉原生質(zhì)體產(chǎn)量的影響。取得如下結(jié)果： 1.橙色大白菜01S303-1的子葉和下胚

2、軸在只附加6-BA和NAA或TDZ和NAA的MS培養(yǎng)基中，不定芽的再生率都很低。 2.AgNO<,3>能大幅度的提高橙色大白菜01S303-1子葉和下胚軸不定芽的再生率。在MS+7 mg/L6-BA+2 mg/LNAA培養(yǎng)基中，添加2 mg/LAgNO<,3>時(shí)，子葉不定芽再生率由不加AgNO<,3>的2.5％提高到57.5％；添加6 mg/L AgNO<,3>時(shí)，下胚軸不定芽再生率由不加AgNO<,3>的0％提高到27.5％。

3、在MS+0.1 mg/L TDZ+1.5 mg/L NAA培養(yǎng)基中，添加10 mg/L AgNO<,3>時(shí)，子葉不定芽再生率由不加AgNO<,3>的0％提高到82.5％。在MS+0.05 mg/L TDZ+4 mg/LNAA培養(yǎng)基中，添加10 mg/L AgNO<,3>時(shí)，下胚軸不定芽的再生率由不加AgNO<,3>的0％提高到25％。 3.在不同培養(yǎng)基中，ABA對(duì)橙色大白菜01S303-1子葉不定芽再生率的影響不同。在MS+7

4、mg/L 6-BA+2 mg/L NAA+2 mg/L AgNO<,3>的培養(yǎng)基中，適當(dāng)濃度的ABA對(duì)子葉不定芽的再生起促進(jìn)作用。當(dāng)ABA濃度為0.3 mg/L時(shí)，子葉不定芽的再生率最高，達(dá)85％。但在.MS+0.1 mg/L TDZ+1.5 mg/L NAA+10 mg/L AgNO<,3>的培養(yǎng)基中，ABA對(duì)子葉不定芽再生率起抑制作用。 4.橙色大白菜不定芽再生率還受到外植體類型、苗齡、基因型等因素的影響。不同外植體的再生能

5、力相差很大，大白菜子葉比下胚軸的再生能力強(qiáng)；6天苗齡比其它苗齡子葉的不定芽再生率較高。本研究使用的01S303-1、04S26、04S1361和04S1363四個(gè)橙色大白菜品系的子葉再生能力有一定的差異，其中01S303-1的再生率最高，04S1361和04S1363次之，04S26最低。 5.IAA和NAA對(duì)橙色大白菜01S303-1不定根的誘導(dǎo)都有促進(jìn)作用。不定根的誘導(dǎo)率隨著IAA和NAA濃度增大而提高，當(dāng)NAA為0.3 m